PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
牛毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：牛毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Bovine Papular Stomatitis Virus(BPSV)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
基因蛋白P53   英文名稱：   aioncogene p53 protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   P53  Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  1808159-02-5  中文名：  分子式：C56H84O20  度：92.0%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

蛋白DKK3   英文名稱：   Dikkopf 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DKK3  Qingyangshengenin  中文名：青陽(yáng)參苷元  分子式：C28H36O8  度：97.5%

異育銀鯽趨化因子CCL5   英文名稱：   Freshwater fish Chemokine C-C motif ligand 5   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CCL-5  Pyrimethamine  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4  度：99.0%

異育銀鯽球蛋白M   英文名稱：   Freshwater fish Immunoglobulin M   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgM  Pyrimethamine  58-14-0  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4  度：99.0%   

異育銀鯽球蛋白D   英文名稱：   Freshwater fish Immunoglobulin D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgD  Pyrimethamine  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4
Betamipron  中文名：倍他米隆  分子式：C10H11NO3    轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T

Betamethasone  中文名：倍他米松  分子式：C22H29FO5    轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測(cè)試劑盒   48T

Benzyl nicotinate  中文名：煙酸芐酯  分子式：C13H11NO2    轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T              

Benzyl L-(+)-mandelate  中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3    轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T

Benzyl cinnamate  中文名：肉桂酸苯甲酯  分子式：C16H14O2    轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒   48T
兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O2 

兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   中文名：  分子式：C12H14ClFN2O 

兔子白三烯B4elisa試劑盒   兔子白三烯B4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子白三烯B4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子白三烯B4試劑盒、兔子白三烯B4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  中文名：5-羥甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4  度：%

兔子白三烯B4(LTB4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   84163-13-3  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子白介素9(IL-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  19131-13-6  中文名：  分子式：C14H24O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
牛毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2  度：98.0%  豚鼠粘多糖   英文名稱：   Mucopolysaccharide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MLC

2-Amino-4'-fluorobenzophenone  中文名：  分子式：C13H10FNO  度：98.0%  兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Enalapril maleate  中文名：馬來(lái)酸依那普利  分子式：C24H32N2O9  度：98.0%  兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Pioglitazone   中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S  度：98.0%  兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Amlodipine besylate  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%  兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。