產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Lawsonia spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT500克

RM-1細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 LoVo(細(xì)胞) 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT 116 [HCT116]鄰-β-D-... 2-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside 2816-24-2 100MG 通用試劑

CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)香精 Jcsminq flcvour

SW480(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 肝素shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克

人尿道上皮細(xì)胞cDNAHUC cDNA崩潰酶(-20℃)NA
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級(jí)

GHR2 金黃地鼠肋骨來源細(xì)胞芐星青每速G Bqnzcthinq bqnzylpqnicillin 1238-09-6

CM-M030小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLD-GlutamicacidD-麩酸10克BR，99%

HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CALCIUMCHLORIDE,1MSTERILE錄化鈣無菌溶液,1M生物技術(shù)級(jí)500MLRT

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0911 人皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMu-Gal 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-1620
A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株植物血凝素Phytohemagglutinin質(zhì)量規(guī)格：BR

人橫紋肌細(xì)胞;A-204 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-糠基氨基嘌呤,激動(dòng)素Kinetin,6-Furfurylaminopurine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸EGTA, egtazic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

ENPEP Others Human 人 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 無水1酸二氫鈉(分子生物學(xué)級(jí)) phosphate, monobasic, anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,分子生物學(xué)級(jí)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T月桂酰基肌氨酸鈉(分子生物學(xué)級(jí)) lauroyl sarcosine質(zhì)量規(guī)格：>95%,分子生物學(xué)級(jí)
勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) Rattus地奧司明Diosimin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地膚子皂苷Ic（標(biāo)準(zhǔn)品）Momordin Ic質(zhì)量規(guī)格：僅供鑒別用

人內(nèi)皮細(xì)胞HLEC地榆皂苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）Ziyuglycoside I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地榆皂苷II（標(biāo)準(zhǔn)品）Ziyuglycoside II質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丁香酚（標(biāo)準(zhǔn)品）Eugenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品