PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
問(wèn)號(hào)鉤端螺旋體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：問(wèn)號(hào)鉤端螺旋體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Leptospira interrogans
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人平滑肌細(xì)胞裂解物HCSMCL肌酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Creatine Monohydrate，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克

AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1.2- 1,2-BUTcNqDIOL 284-03-

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino三氧化鉬 Molybdqnum trioxidq 1313-7-2

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL5-嶙酸吡哆醛，英文名或英文縮寫(xiě)：PLP，級(jí)別：IND，規(guī)格：5克

A549, 人細(xì)胞系 HumanEC肉湯EC BROTH FOR MICROBIOLOGY
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)(S)-2-基-3-(4-咪唑基)，英文名或英文縮寫(xiě)：L-Histidine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：10克

EJ(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺大平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)-2，4-二硝基... -2,4-DNPH 888-54-0 1ML 標(biāo)準(zhǔn)品

間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基MADM-prf二茂鐵;環(huán)務(wù)二1鐵 Fqrrocqnq;Biscyclopqntcdiqnyl iron;Di-2,4-cyclopqntcdiqn-1-yl iron 10-24-2

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4,4'-Bipyridineγ,γ-聯(lián)1克AR，99%

大鼠完全培養(yǎng)基 100mL10034-82-9wo7ium chromate tetrahydrate
GBP1 Others Human 人 GBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 增甘1(>97.0%(T))Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)

木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLN-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 PC9-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin氮基三乙酸二鈉鹽(>99.0%(T))Nitrilotriacetic Acid Di Salt質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)

IL32 Protein Human 重組人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)N-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

人平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞 Rattus三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
問(wèn)號(hào)鉤端螺旋體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蛋白酶K(進(jìn)分)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝

CM-H025人胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝

HuTu-80細(xì)胞，人十二指腸腺癌細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,HME2細(xì)胞 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制劑Chymostatin質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分

H9c2(2-1) (大鼠心肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(進(jìn)口)Leupeptin 質(zhì)量規(guī)格：≥95%,進(jìn)口半硫酸鹽

CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑Pepstatin A microbial質(zhì)量規(guī)格：≥90%,進(jìn)分

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。