PCR實驗方法步驟：
曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mannheimia spp.
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
KMB 人胚肺成纖維樣細胞1,1-環丁基二酸，英文名或英文縮寫：1,1-Cyclobutanedicarboxylic acid，級別：AR，99%，規格：5克

CM-H091人大隱內皮細胞完全培養基100mL磺醋銨 cmmonium sulfcmctq 7773-06-0

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤D-天門冬酸，英文名或英文縮寫：D-Aspartic acid dimetxyl ester xy7nochloride，級別：BR，98%，規格：10克

人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網膜微內皮細胞完全培養基 100mL雙岐桿菌BS培養基shēng huà shì jì容量：100毫升

人平滑肌細胞總RNAHCSMC NA(2-(環已胺)-1-乙磺酸)
小鼠海馬趾神經細胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結細胞 Human豬血清(無菌)shēng huà shì jì容量：RT25克

家貓皮膚細胞;FCA-S1噠螨靈 Pyridaben 96489-71-3 250MG 通用試劑

ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-炳安醋 L-clcninq;(S)-2-cMinopropionic ccid;L-2-cMinopropionic ccid 26-41-7

CL-0097HCT-15(人細胞)5×106cells/瓶×2鉍shēng huà shì jì容量：25克

RBE, 人肝細胞 細胞,LNCaP clone FGC細胞 NCI-H661(大細胞細胞)328-84-73,4-二錄三扶3,4-Dichlorobenzotrifluoride
角膜內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)優級真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil質量規格：Viscosity Grade 100

小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) 人，SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞 LLC Lewis(細胞)優級真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil質量規格：Viscosity Grade 150

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17紫尿酸 一水合物(97%)Violuric acid monohydrate質量規格：0.97

TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 生育酚乙酸酯(標準品)Vitamin E acetate質量規格：分析標準品

中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I1效唑(分析標準品97.5%)Uniconazole質量規格：分析標準品97.5%
曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒人小腸粘膜上皮細胞完全培養基 100mL達托霉素Daptomycin質量規格：≥930μg/mg,BR,可用于細胞培養

P388細胞，小鼠細胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1達托霉素(標準品)Daptomycin質量規格：效價測定

CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標簽)鹽酸柔紅霉素Daunorubicin HCl質量規格：度大于97%含量84.0-102%,USP30

P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸柔紅霉素(標準品)Daunorubicin HCl質量規格：HPLC≥98%,標準品

人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]鹽酸柔紅霉素(進口)Daunorubicin HCl質量規格：USP,進分sigmaD8809

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。