操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：單核細(xì)胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Listeria monocytogenes
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
單核細(xì)胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
HUVEC細(xì)胞，人臍內(nèi)皮細(xì)胞 人肝細(xì)胞正常,HL-7702細(xì)胞 CL-0072Daudi(人瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2光甘草定質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Glabridin

人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1鬼臼（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Podophyllotoxin

TFPI Others Human 人 TFPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鬼臼(95%)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,BRPodophyllotoxin

腎實質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)鬼臼(85%)質(zhì)量規(guī)格：>85%,BRPodophyllotoxin

TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(25-35)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRβ-Amyloid (25-35)
大鼠細(xì)胞;IR983F100克

CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-蘇酸 DL-Theronine,≥90% 80-68-2 25G 通用試劑

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-prf異炳基環(huán);六輕異炳本;六輕枯1;2-環(huán)己基炳烷 Isopropylcyclohqxcnq;Hqxcxy7nocuMqnq;2-Cyclohqxylpropcnq 696-9-7

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 本二酸氫鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium xy7nogen phthalate，級別：AR，規(guī)格：5克

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYM556-50-3甘酰甘酸;甘勝;雙甘肽;一縮二基乙酸Glycylglycine;Diglycine
HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))Lauric acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)

CL-0153MDBK(牛腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))Nervonic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)

MGC80-3(MGC-803)人細(xì)胞 細(xì)胞，Coc2細(xì)胞 HEC-1-B(子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Pentadecanoic Acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

人非小細(xì)胞;NCI-H1975泛酸鈣一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 山梨酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Potassium sorbate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
單核細(xì)胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膽戊基碳酸酯Cholesterol Amyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL膽正辛基碳酸酯Cholesterol n-Octyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

NFS-60細(xì)胞，小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1膽己基碳酸酯Cholesterol Hexyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。