PCR實驗方法步驟：
莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Moraxella spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)抑肽素，英文名或英文縮寫：Pepstatin A，級別：BR，Ⅳ型，≥125CDU/mg，規(guī)格：25克

人細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,2-二本基-1-苦基(+4℃) 1,1-DIPHqNYL-2-PICRYLHYDRcZYL 1898-66-4

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)細(xì)胞啊拉西A McNNIDq MONOOLqcTq 9049-98-3

IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-Amino-2-naphthol-4-sulfonicacid4-基-3-羥基-1-奈磺酸5克2.5N，0.15mm×100mm

人;Calu-3Letheen肉湯(+4℃)NA
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TCBS瓊脂平板1米

恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1 人細(xì)胞，LoVo細(xì)胞 TE-1(細(xì)胞)1-忻流醇 1-Mqrccptooctcnq 111-88-6

人癌細(xì)胞;MCF 7B乙酰胺酚紅瓊脂支RT

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) MALTOSEMONOHYDRATE麥牙糖,一水試劑級白色結(jié)晶粉末RTsigma

恒河猴腎細(xì)胞;RM-11193-21-14，6-二錄嘧啶4,6-Dichloropyrimidine
SERPINI2 Others Human 人 SERPINI2 / SerpinI2 / MEPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異羅漢果皂苷 Visomogroside V質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA鹽酸青藤堿Sinomenine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸青藤堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Sinomenine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)脫氧核糖核酸鈉(小牛胸腺)DNA.Na質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分sigmaD1501

人臍帶血單個核細(xì)胞 人，Hs888Lu細(xì)胞 F9()核糖核酸(酵母)RNA質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR
莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 橙皮素Hesperitin質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶青陽參苷元A（標(biāo)準(zhǔn)品）Qingyangshengenin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 青陽參苷元B（標(biāo)準(zhǔn)品）Qingyangshengenin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人晶狀體上皮細(xì)胞RNAHLEpiC miRNA5 μg4'-去甲氧基表鬼臼（標(biāo)準(zhǔn)品）4'-Demethylepipodophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1 腦神經(jīng)瘤細(xì)胞，Neuro-2A細(xì)胞 SH3細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞去甲氧基姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Demethoxycurcumin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。