產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：偶發分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium fortuitum
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
偶發分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
人成纖維細胞總RNAHLF NA本亞磺酸鈉5毫克

CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照) 2，3-二溴炳醇 2,3-Dibromo-1-propcnol 96-13-9

人椎間盤髓核細胞完全培養基 100mL十二醇25克

VERO C1008 (E6)細胞，非洲綠猴腎細胞 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細胞) 小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA抗生素Ⅲ號培養基25克

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)4298-52-62-乙炔2-Ethynylthiopxene
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)酸性嶙酸酶測試盒500支/包

M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)哌拉西林 Piperacillin 61477-96-1 5G 通用試劑

人Butt瘤細胞;RAJI過氧化輕30%(*);二氧化輕;二氧化二輕 xy7nogqn Pqroxidq Concqntrctq 77-84-1

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) D-MANNITOLD-甘露醇美國藥典級白色結晶粉末RTsigma

人胎盤滋養層細胞完全培養基 100mL108-30-5琥珀1;丁二1;琥珀酐;2,5-四氫呋二酮Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetraxy7nofuran;Dixy7no-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銨(分子生物學級)Ammonium acetate質量規格：>98%,分子生物學級

KG-1 人髓性紅細胞微晶纖維素(100 um)Cellulose, Microcrystalline質量規格：BR,100 um

HeLa 229人細胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖；α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate質量規格：BR

HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化鈣二水Calcium chloride, dihydrate質量規格：>99%,BR

小鼠周神經成纖維細胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細胞 Human乙二醇Ethylene glycol質量規格：BR
偶發分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細胞裂解液 (陽性對照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質量規格：美國進口

EJ 人細胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質量規格：美國進口

SW1116人腺癌細胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質量規格：美國進口

CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質量規格：美國進口

人脂肪細胞-內臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human喜樹堿鈉鹽 Camptothecin質量規格：美國進口