操作流程：
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium simiae
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human(+/-)-氯前列醇鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(+/-)-Cloprostenol  salt hydrate

TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (+)-氯前列醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(+)-Cloprostenol

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞HRGEC頭孢氨芐水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Cephalexin Hydrate

HA Others H10N9 甲型 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2-二羥基聯(lián)本25克

大鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLTAPSO 10g/100g原裝 Sigma T9269
骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鳥嘌呤鹽酸鹽100克

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6-羌基-2,5,7,8-四基本并二輕-2-羧醋 6-xy7noXY-2,5,7,8-TqTRcMqTHYLCHROMcN-2-CcRBOXYLIC cCID 23188-07-1

Rat Asocytes 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞AGAROSEITAETS,500MG瓊脂糖Ⅰ型,超級(jí)1000 TAETSRT

中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]溴紫10ku保存：-20℃

DU 145, 人細(xì)胞(布里杰-35)
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6 巨核細(xì)胞細(xì)胞，Dami細(xì)胞 NR8383細(xì)胞，大鼠肺泡巨噬細(xì)胞樣生長因子I（57-70）Insulin-like Growth Factor I (57-70)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HEC-1A, 人細(xì)胞系 Human樣生長因子Ⅱ（69-84）Insulin-Like Growth Factor II(69-84)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CDH5 Others Human 人 CDH5 / Cadherin-5 / CD144 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白介素-1β轉(zhuǎn)化酶底物Interleukin-1β Convertase Substrate質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

上皮細(xì)胞培養(yǎng)基BEpiCM-prf下鈣素Katacalcin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

LYVE1 Others Mouse 小鼠 LYVE1 / LYVE-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肯普肽Kemptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒RLE-6TN細(xì)胞，大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 PC-3(人細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Allocryptopine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)LGD-4033 LGD4033 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

16HBE(人上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH35-溴嘧啶5-Bromopyrimidine 質(zhì)量規(guī)格：>98%

人上皮細(xì)胞;Hep-2阿螺旋霉素17-DMAG質(zhì)量規(guī)格：HSP90 抑制劑，進(jìn)分

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大豆異黃酮Soybean isoflavones質(zhì)量規(guī)格：染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。