操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium pinnipedii
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21α-溴異shēng huà shì jì容量：RT25克

人癌細胞;SK-BR-3葉綠速A(-20℃) CHLOROPHYLL c 479-61-8

CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘油 (分子生物級) Glycerol (for molecular biology, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑

MJ(懸浮) 瘤MiddleBrook7H11瓊脂shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

95-D人高轉(zhuǎn)移細胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(D-海藻糖)
人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]Fluridone1-甲基-3-本基-5-(3-三扶甲基本基)-4(1H)-酮150u高，95%

HBZY-1細胞，人腎小球髓母細胞 大鼠埀體瘤細胞,GH3細胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2酚(異構(gòu)體混和物) Crqsol 1319-77-3

Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2C.L.E.D培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：200張/盒

NHEM-c M2 adult 正常人表皮素細胞(NHEM)成年捐獻者(M2培養(yǎng)液中培養(yǎng)) 500,000cells 胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)ADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級白色結(jié)晶粉末FROZENsigma

骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-基基氧硅烷NA
NCI-H460(人細胞) 5×106cells/瓶×2 腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胰酶(1:4500)Pancreatin質(zhì)量規(guī)格：酶活1:4500,BR

支原體PCR檢測試劑盒MYCO枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君Orphenadrine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL12A & IL12B Others Human 人 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) β-半乳糖苷酶β-Galactosidase質(zhì)量規(guī)格：700u/mg，羅氏分裝

CatS2 家貓皮膚成纖維樣細胞脫落酸(標準品)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格：98%,標準品

CL-0070CRFK(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2脫落酸(高)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格：98%,BR
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒CDH12 Others Human 人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙二酸(AR)Malonate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

人滑膜細胞HS氯化錳四水Manganese (II) chloride, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 干酪素Casein質(zhì)量規(guī)格：BR

大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL醫(yī)用凡士林Vaseline質(zhì)量規(guī)格：BR

HMy2.CIR人B母細胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS原釩酸鈉 orthovanadate質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。