產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma felis
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CFPAC-1細胞，人細胞 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞,RD細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albinoβ-Alanine3-基酸10克BR，98%

Hs 578T(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2二甲基黃 Dimethyl yellow,98% 1960-11-7 10G 通用試劑

Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人細胞分離液) 500ml錄化金(+4℃)(陰涼);四錄金醋;錄金水合物 Gold(III) chloridq hydrctq;xy7nogqn tqtrcchlorocurctq(III) hydrctq;Tqtrcchlorocuric(III) ccid 13423-07-1

人前脂肪細胞-內臟裂解物HPA-v LPROTEINMWMARKER,LOWRANGE蛋白Marker生物技術級暗藍色透明液體FROZENsigma

CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 923-61-5二棕櫚酰-L-a-1脂酰1,2-DIPALMITOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOETHANOLAMINE
狗肺成纖維樣細胞;DogL1Dimetxylyellow甲基黃25克電泳級，90%

人成纖維細胞(HPrF)(5×105)1,3-二錄本;間二錄本 1,3-Dichlorobqnzqnq 241-73-1

CL-0123IBRS-2(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2工;水銀 Mqrcury;Quick silvqr

人腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮細胞完全培養基 100mLZ-甘酰-L-脯酰-L-精酰對硝基鹽，英文名或英文縮寫：Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt，級別：BR，98%，規格：5克

BEL/FU 人尿嘧啶耐藥株肝素鈉標準品(冷凍運輸)NA
Tsu-Pr1細胞，非型 人子宮內膜腺癌細胞,KLE細胞 微內皮細胞cDNAHCMEC cDNA依匹斯汀Epinastine質量規格：美國進口

非洲綠猴腎細胞;VERO9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride質量規格：美國進口

CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-氯依匹斯汀鹽酸鹽7-Chloro Epinastine Hydrochloride質量規格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK9-氧絡依匹斯汀鹽酸鹽9-Oxo Epinastine Hydrochloride質量規格：美國進口

LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 6β-羥基依普利酮6β-Hydroxy Eplerenone質量規格：美國進口
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Hep3B2.1-7細胞，人細胞 人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺（標準品）Pyrazinamide質量規格：含量測定

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2鹽酸地美環素；去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride質量規格：>900μg/mg,BR

Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質干細胞軟骨分化培養基無誘導劑(即用型) 100ml鹽酸地美環素；去甲基金霉素(標準品)Demeclocycline hydrochloride質量規格：效價測定,標準品

人海馬趾神經元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕羅西汀N-Methyl Paroxetine質量規格：>99%

小鼠神經質細胞(MN-sn)(1×106)硫酸頭孢喹諾Cefquinome sulfate質量規格：干品Cefquinome>80%,BR