PCR實驗方法步驟：
犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma haemocanis
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SMMC-7721細胞，細胞 人羊膜細胞系,Wish細胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C113,5-雙(3,5-二甲氧基芐氧基)芐醇(>94.0%(GC))質量規格：>94.0%(GC)3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Alcohol

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E73,5-雙(3,5-二甲氧基芐氧基)芐溴(>97.0%(HPLC)(T))質量規格：>97.0%(HPLC)(T)3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Bromide

HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,5-雙[3,5-雙(3,5-二甲氧基芐氧基)芐氧基]芐溴(>97.0%(T))質量規格：>97.0%(T)3,5-Bis[3,5-bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyloxy]benzyl Bromide

人成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg3',5'-二乙酰氧基苯乙酮(>95.0%(GC))質量規格：>95.0%(GC)3',5'-Diacetoxyacetophenone

大鼠管狀上皮細胞(RRTEpiC)(5×105)3',5'-二溴-4'-羥基苯乙酮(>97.0%(GC))質量規格：>97.0%(GC)3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone
HelaS3 Phosphomolybdicacidhydrate十二鉬嶙酸25克GR，98%

5637人細胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS苯甲脒 Benzamidine hydrochloride hydrate,≥99% 618-39-3 5G 通用試劑

TNF Protein Human 重組人 TNF-alpha / TNFA 蛋白糠基流醇 Furfuryl mqrccptcn 1998--

大鼠脊柱神經細胞(RSCMN)(1×106) UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌 HumanWORT肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃5毫升

肝星形細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6009-70-7一水草酸銨Ammonium oxalate monohydrate
HAVCR1 Others Mouse 小鼠 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 一水脫氧膽酸鈉 deoxycholate monohydrate質量規格：美國進口

真皮微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)雷米普利拉-d5Ramiprilat-d5質量規格：美國進口

RPS6KA2 Others Human 人 RSK3 / RPS6KA2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雷米普利-d3 Ramipril-d3質量規格：美國進口

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A雷米普利拉Ramiprilat質量規格：美國進口

VERO C1008細胞，非洲綠猴腎細胞 人胰腺腺泡上皮癌,HPAC細胞 CM-M087小鼠軟骨細胞完全培養基100mL甲基4,7,8,9-四-O-乙酰-2-硫代-N-乙酰-a-D-神經氨酸甲酯Methyl4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2-thio-N-acetyl-a-D-neuraminic acidmethylester質量規格：美國進口
犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 間充質干細胞神經性分化培養基(即用型) 100ml吡羅昔康(標準品)Piroxicam質量規格：HPLC>98%,標準品

人內皮細胞HCAEC泊沙康唑Posaconazole質量規格：>99%

SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 泊沙康唑(標準品)Posaconazole質量規格：HPLC>98%,標準品

非洲綠猴腎細胞;CV-1利福昔明Riimin質量規格：>98.0%,可用于細胞培養

大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.3 ，SPC-A-1細胞 B/c-ES細胞，BALB/c小鼠ES細胞利福昔明(標準品)Riimin質量規格：>98%,標準品

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。