PCR實驗方法步驟：
新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1，Superbug)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SW1990細胞，人細胞 人胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Acetoxy Tamoxifen

HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分)質(zhì)量規(guī)格：美國進口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)

人基質(zhì)細胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物)質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)

IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (1R,4R)-N-去甲基鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格：美國進口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride
Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)DEAE葡聚糖凝膠A-50shēng huà shì jì容量：5KU

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸 Methyl linoleate,≥99% 112-63-0 1G 通用試劑

人成細胞;MG-63肝速酶I(-20°C) HqPcRINcSq 902-39-

豚鼠心肌細胞;GP-H1 EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細胞，B95-8細胞 MEL細胞，小鼠紅細胞PONCEAUS麗春紅S (猩紅S)*深紅色結(jié)晶粉末RTsigma

人胚;MRC-5587-84-8二本胺化 98%DIpxenYLAMINE SULFATE
CM-H010人小氣道上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸普魯卡因(標準品)Procaine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

WM35, 人色素瘤細胞伏立諾他雜質(zhì)Vorinostat impurity質(zhì)量規(guī)格：>98%

人細胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠完全培養(yǎng)基 100mL當藥醇苷(標準品)Swertianolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml皂素(進分)saponin質(zhì)量規(guī)格：進分，≥10 %

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 苦豆堿Aloperine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,BR
新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒LOVE1細胞，結(jié)細胞 人色素瘤細胞,B16細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;HH-29巴馬汀氯化物一水合物(分析標準品)Palmatine chloride hydrate質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

HCC827(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2BSA[=N,O-雙(*基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(GC)

ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照) BSTFA[=N,O-雙(*基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于氣相色譜)

人肝細胞;HL-7702[L-02]N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照) TMS-咪唑(=N-*基硅基咪唑)(>98.0%(T))TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。