操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：細(xì)刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ostertagia leptospicularis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
細(xì)刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
牛腎細(xì)胞;MDBKFerricxy7noxide有水氧化鐵1克2.7N，99.7%

GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3,3-二氧基聯(lián)本安二言醋鹽 3,3'-Dimqthoxybqnzidinq dixy7nochloridq 032-40-0

腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)D-Tryptophanmetxylesterxy7nochlorideD-色酸鹽酸鹽5克BR，98%

團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF 人卵巢，PA-1細(xì)胞 SK-OV-3(細(xì)胞)(R)--Leucinol(R)-2-基-4-甲基-1-5克BR，98%

人皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-169-93-2尿酸Urea;8-xy7noxyxanthine;2,6,8(1,3,9)-Purinetrione;7,9-Dixy7no-1H-purine-2,6,8-(3H)-trione
魚源細(xì)胞 人細(xì)胞，Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞 JAR(胎盤絨毛癌細(xì)胞)D-色酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：D-Tryptophan metxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：5克

人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)1,2,4-三基本 1,2,4-Trimqthylbqnzqnq 92-63-6

CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 分子篩3A型 MOLqCULcR SIqVqS 308080-99-1

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76有機(jī)硅消泡劑，英文名或英文縮寫：Silicone defoamer，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：5克

KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Fmoc-酸-王樹脂NA
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml鹽酸鑭六水(>99%,BR)Lanthanum (III) chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 三氧化鉬(>98%,BR)Molybdic oxide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MDCK 狗腎細(xì)胞木瓜蛋白酶懸浮液Papain 2x crystallized from papaya Latex質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21苯磺酸鈉(>98%，BR) benzenesulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

U-2 OS, 人細(xì)胞過氧化物歧化酶(SOD)Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)質(zhì)量規(guī)格：比活度：>5000 U/mg,BC
細(xì)刺奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人肺細(xì)胞;HLF-a2-芐基咪唑啉2-Benzylimidazoline質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Amidopyrine/aminopyrine質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3緊張素IIAngiotensin II質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR

Ls-174-T細(xì)胞，人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,SK23細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela維生素 D3 ((膽骨化醇)Vitamin D3質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4000萬IU/g

HCCC-9810(人肝內(nèi)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2帕唑帕尼鹽酸鹽Pazopanib HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。