PCR實驗方法步驟：
孟氏尖旋線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：孟氏尖旋線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Oxyspirura mansoni
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠瘤株;S180四甲基錄化1公斤

CDH12 Others Human 人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照) 2 2 4 4 6-五溴聯(lián)本迷 2,2',4,4',6-PqNTcBROMODIPHqNYL qtqr 189084-64-8

人滑膜細胞HS2-基本并噻唑500克RT

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化酶測試盒20個/包

大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL556-96-75-溴-間二，98%5-Bromo-m-xylene
HMGB1 Others Mouse 小鼠 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) Boc-L-tyrosineN-叔丁氧羰基-L-酪酸1克BR，99%

IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL頭孢美坐 CqfMqtczolq 26796-0-4

MGC80-3人細胞 Human gasic cancer cells MGC80-3 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSTriisoamylamine三(3-甲基丁基)胺25毫克高，98%

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白NZMBROTHNZM 肉湯, 粉末生物技術(shù)級100GRT

人內(nèi)皮細胞 (HLEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse(腺嘌呤)
IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白鹽酸多沙普侖Doxapram hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人成纖維母細胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse琥珀酸多西拉敏-d5Doxylamine-d5 Succinate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu7-氯甲基屈螺酮7-Chloromethyl Drospirenone質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MFGE8 Others Human 人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 屈螺酮酸鉀鹽Drospirenone Acid Potassium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CL-0161MRC-5(人胚 )5×106cells/瓶×23,17β-O-二(甲氧甲基)雌二醇3,17β-O-Bis(methoxymethyl)estradiol質(zhì)量規(guī)格：美國進口
孟氏尖旋線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽)腺苷3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯，8-氯-,Rp-異構(gòu)體鈉鹽Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, 8-Chloro-, Rp-Isomer,  Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人視網(wǎng)膜色素上皮細胞(HRPEpiC)(5×105 ) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞 Human阿西替尼Axitinib質(zhì)量規(guī)格：>99%,VEGFR 抑制劑,細胞培養(yǎng)級

人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7阿扎哌隆Azaperone質(zhì)量規(guī)格：>99%

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸阿扎司瓊Azasetron HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞氮卓斯汀堿Azelastine base 質(zhì)量規(guī)格：>97%

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。