PCR實驗方法步驟：
展開青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：展開青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Penicillium patulum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細胞裂解液 (陽性對照) 并四苯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)Naphthacene

人髓母細胞瘤細胞;D341Med并四苯 (升華提)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)Naphthacene (purified by sublimation)

KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照) 并五苯(以升華法化)質(zhì)量規(guī)格：Pentacene (purified by sublimation)

Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells顏料藍 15(以升華法化)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Pigment Blue 15 (purified by sublimation)

H4細胞，人(H4) 沙門氏菌 人成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg1,1-環(huán)丙基乙二羧酸質(zhì)量規(guī)格：>98%1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid
動物上皮細胞培養(yǎng)基EpiCM-aNEUTRALRED,>90%中性紅*1G553-24-2RT

TGM3 Others Human 人 TGM3 / ansglutaminase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 葡萄糖淀分酶(+4℃) cMYLOGLUCOSIDcSq 903-08-0

人;HFL1MOPSwo7iumsalt3-(N-嗎啉)磺酸鈉5克BR，99%

CRFK細胞，貓腎細胞 結(jié)細胞,LOVE1細胞 CM-H069人膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰-L-谷酸10克RT

大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5FBacitracin 500ku原裝/250ku原裝 Amresco E952
小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Esmolol HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人星形膠質(zhì)細胞 Human鹽酸艾司洛爾Esmolol HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CD9 Others Human 人 CD9 / Tspan-29 人細胞裂解液 (陽性對照) H-Met-OtBu.HCLH-Met-OtBu·HCl質(zhì)量規(guī)格：0.98

羊源細胞麥芽糖醇Maltitol 質(zhì)量規(guī)格：>98%

IL1RAPL1 Others Mouse 小鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽L-Threonine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：0.98
展開青霉探針法熒光定量PCR試劑盒A3人T細胞細胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS亮藍Erioglaucine di salt質(zhì)量規(guī)格：85%,BS

FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白阿立哌唑Aripiprazole質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

B16-F1(小鼠色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細胞HA阿立哌唑（標(biāo)準(zhǔn)品）Aripiprazole質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人cDNAHPF cDNA子囊霉素Ascomycin,FK520質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 子囊霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）Ascomycin,FK520質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。