PCR實驗方法步驟：
鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Pleisiomonas spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
A-204細(xì)胞，人橫紋肌細(xì)胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3N-去甲基羅格列酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Desmethyl Rosiglitazone

U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤) 5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide

HT-1080(人纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9401磺胺嘧啶質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sulfadiazine

人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5537LCN-乙酰基磺胺嘧啶質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Acetyl Sulfadiazine

RK2 Others Mouse 小鼠 RK2 / kB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5'-羥基苯卡維地洛質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口5'-Hydroxyphenyl Carvedilol
SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細(xì)胞株 單核細(xì)胞型瘤細(xì)胞,THP 1細(xì)胞 FaDu(人咽鱗癌細(xì)胞)2-本并噻唑shēng huà shì jì容量：5克

野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d3-叔丁基-4-羌基茴香迷 3-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 11-00-6

SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二基奈shēng huà shì jì容量：100克

大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1metxylpalmitate軟脂酸100克2.5N，99.5%

MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 142-28-91,3-二錄1,3-Dichloropropane;Trimetxylene dichloride
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM溴藍(lán)[pH指示劑]Bromochlorophenol Blue質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑

APCDD1 Others Human 人 APCDD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙基橙[pH指示劑]Ethyl Orange質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑

人B母細(xì)胞;HMy2.CIR4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽性);NRK49F 轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞，AsPC-1細(xì)胞 McCoy細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞系DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]質(zhì)量規(guī)格：用于蛋白質(zhì)組分析，用于高效液相色譜標(biāo)記，熒光染料，用于質(zhì)譜的衍生化試劑

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 Human2,3-萘二醛(>99.0%(GC))2,3-Naphthalenedialdehyde質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)
鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1ABYL719BYL-719質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3Kα抑制劑

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) VRT752271VRT-752271.HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽酸鹽形式,蛋白激酶抑制劑

CoC2(懸浮) 奧拉甲磺酸鹽Obatoclax Mesylate;GX15-070質(zhì)量規(guī)格：≥98%,Bcl-2拮抗劑

COLO 205人細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS羊藿素(標(biāo)準(zhǔn)品)Icaritin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白銀杏內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginkgolide A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。