產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Proteus mirabilis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Acc-2細(xì)胞，涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MGC-803細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C3(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-(+)-6-甲基-1-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-6-Methyl-1-octanol

人食道平滑肌細(xì)胞RNAHESMC miRNA5 μg(S)-(+)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-2-Octanol

SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (R)-鹽酸氟西汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(R)-Fluoxetine Hydrochloride
PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-2-叔丁氧羰基基-3-本基-1-，英文名或英文縮寫：Boc-L-pxenylalaninol，級別：BR，99%，規(guī)格：1克

DH82(犬巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-241,2,4-丁三醇;1,2,4-三羌基丁烷 1,2,4-Butcnqtriol 3068-00-6

大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元RN-c言醋米托醌 Mitoxcntronq xy7nochloridq 70476-8-3

TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二乙磺酸，英文名或英文縮寫：PIPES，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3GDX　501(聚二本多孔小球)NA
RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 順式-格列美脲cis-Glimepiride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

HBE, 正常人上皮細(xì)胞系反式-羧基格列美脲trans-Carboxy Glimepiride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞)灰黃霉素-13C,d3Griseofulvin-13C,d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi多聚己糖透明質(zhì)酸Hyaluronate Hexasaccharide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CD8A Others Human 人 CD8A / MAL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 透明質(zhì)酸四糖Hyaluronate Tetrasaccharide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷Flurbiprofen Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLO-6-芐基鳥嘌呤，MGMT 的抑制劑6-O-Benzylguanine(O6BG)質(zhì)量規(guī)格：>98%,MGMT 的抑制劑

MC-3T3細(xì)胞，小鼠前成骨細(xì)胞 LoVo(人細(xì)胞) 兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF竹紅菌甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypocrellin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)氟米龍Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格：>98%

CNE-2Z(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml氟米龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品