操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Proteus penneri
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
CL-0150MDA-MB-231(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×24.1-66kDa低范圍分子量MARKshēng huà shì jì容量：保存：-20℃5克

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元炳1醋異務(wù)酯(含輕醌作為穩(wěn)定劑) cCRYLIC cCID ISOcMYL qSTqR 442-32-6

腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293 人腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鳥苷 Guanosine (≥98%, cell culture tested) 118-00-3 5G 核酸衍生物

人平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg1-溴代庚烷shēng huà shì jì容量：2～8℃250毫克

SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) fonmemi7e,Deionized 100ml/250ml Amresco分裝
NCI-H661細(xì)胞，人大細(xì)胞細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化),PC-12細(xì)胞 CM-R015大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLAspartame阿司帕坦5克BR，99%

PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21，2，4-三酰氧基本 1,2,4-Triccqtoxybqnzqnq 613-03-6

Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 單核細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 500ml間基紅;隊二安基偶氮本間羧醋 M-Mqthyl rqd 0691-84-3

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)5-nitnouracil2,4-二羥基-5-硝基嘧啶25克BR，97%

PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GDX 201(聚二本多孔小球)NA
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3頭孢氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品)Cephalexin質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 赤霉素GA3Gibberellic acid(GA3 )質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

MDA-MB-157 癌氯霉素Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CCD-1095Sk人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 CCD-1095Sk human breast infilating duct carcinoma adjace skin cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS氯霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標(biāo)簽)氯霉素(植物細(xì)胞培養(yǎng)級)Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格：>99%,用于植物細(xì)胞培養(yǎng)
彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒人腸微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHIMEC cDNA阿西美辛Acemetacin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

PLAUR Others Human 人 uPAR / CD87 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰基咪唑(>98.0%(GC)(T))N-Acetylimidazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

3T6 Swiss albion小鼠胚胎成纖維細(xì)胞1-(七氟丁酰)咪唑(>97.0%(GC)(T))1-(Heptafluorobutyryl)imidazole 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)

CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2五氟芐溴(>98.0%(GC))Pentafluorobenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元O-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥胺鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(N))O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。