PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
莫氏立克次體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：莫氏立克次體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Rickettsia mooseri
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23，4-二羥基shēng huà shì jì容量：RT5克

HCC1937(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯(lián) 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3

人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT100克

IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Myoglobinfromeinoneeskeletalmuscle肌球素25克BR，2-6u/mg

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞59-92-73-(3，4-二羥基本)-L-酸;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羥基本酸; β-[3,4-二羥本基]L-初油基酸3-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Levodopa; 3-xy7noxy-L-tyrosine; 2-AMino-3(3,4-dixy7noxypxenyl)propanoic acid; β-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Bendopa; Deadopa;
CL-0001293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：RT25毫升

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系 腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞,SW 13細(xì)胞 TT(人細(xì)胞)言醋羅哌卡應(yīng)有關(guān)物質(zhì)A隊(duì)照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2增氧靈，英文名或英文縮寫：Calcium peroxide，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：5克

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升

大鼠細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍(lán)靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent
H4(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CM-M051小鼠子宮頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815 小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
莫氏立克次體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL耐爾藍(lán)A(>65%,BS)Nile blue A質(zhì)量規(guī)格：>65%,BS

人癌細(xì)胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-丙氨酸Z-β-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CBZ-D-谷氨酸α-芐酯Z-Glu-OBzl質(zhì)量規(guī)格：>98%

CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-芐氧羰基-L-酪氨酸Z-Tyr-OH質(zhì)量規(guī)格：0.98

CNE1, 人細(xì)胞系 草魚(yú)吻端細(xì)胞,ZC-7901細(xì)胞 SW480 [SW-480](人細(xì)胞)Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。