PCR實驗方法步驟：
中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Staphylococcus intermedius
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
D407細胞，人視網膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T細胞性細胞;I 2.1(CRL-2572)(R)-N-去乙基奧昔布寧鹽酸鹽質量規格：美國進口(R)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標簽)α-去環己基-α-苯基奧昔布寧質量規格：美國進口α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-N-去乙基鹽酸奧昔布寧質量規格：美國進口(S)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)(S)-鹽酸奧昔布寧質量規格：美國進口(S)-Oxybutynin hydrochloride

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧司他韋酸質量規格：美國進口Oseltamivir Acid
前脂肪細胞培養基PAM-prf10-羥基喜樹堿(標準品)質量規格：HPLC>98%,S構型，標準品(s)-10-hydroxycamptothecin

Hela細胞，人Hela細胞耐藥亞株(Hela/DDP) 小鼠骨髓細胞,FDC-P1細胞 原代神經元細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml甘草素（消旋）質量規格：HPLC≥98%，標準品Liquiritigenin

HB611(人細胞) 5×106cells/瓶×2鳥嘌呤硫酸鹽質量規格：>98.0%，進口原裝Guanine Sulfate

hMSC-UC Pellet 人類臍帶基質中的間質干細胞團塊 > 1 mio.cells 人總RNAHPF NA腺嘌呤鹽酸鹽質量規格：>98%,BRAdenine hydrochloride

CM-M097小鼠皮下脂肪細胞完全培養基100mL肌苷；核苷質量規格：>98.5%,BRInosine
CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基纖維素10克

Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2,4-二錄錄芐 2,4-Dichlorobqnzyl chloridq 94-99-2

CCRF-CEM細胞，人急性細胞T細胞 小鼠細胞,C3細胞 人肝竇內皮細胞cDNAHHSEC cDNA尼龍膜N+5克2～8℃

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2菌種培養基shēng huà shì jì容量：100毫升

CT26.WT(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10-錄本酚2-Chloropxenol
中間葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒mCF, 小鼠成纖維細胞 MouseN-芐氧羰基-L-蘇氨酸Z-Thr-OH質量規格：0.98

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽N-Benzylglycine hydrochloride質量規格：美國進口

人癌細胞;MDA-MB-453N-芐基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester質量規格：美國進口

人內皮細胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韋Zanamivir Amine質量規格：美國進口

CL-0431RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2維達列汀羧酸代謝產物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite質量規格：美國進口

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。