操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：申克孢子細菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Sporothrix schenckii
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
申克孢子細菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-芐基甘氨酸乙酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Benzylglycine ethyl ester

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白氨基扎那米韋質(zhì)量規(guī)格：美國進口Zanamivir Amine

狗間葉干細胞(脂肪)(5×105) GBC-SD, 人細胞 Human維達列汀羧酸代謝產(chǎn)物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite

腮腺細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)5-乙酰水楊酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口5-Acetylsalicylic acid

TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) NVP-BKM120質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3K抑制劑BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)
人腸微內(nèi)皮細胞HIMEC依達拉奉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Edaravone

HS68細胞，人男性正常細胞系 大鼠嗜堿性粒細胞性細胞,RBL-1細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM氫化奎寧定;雙氫奎尼丁質(zhì)量規(guī)格：>95%Hydroquinidine

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2毒莠定(分析標準品,98.5%)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98.5% Picloram

AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R051大鼠子宮頸上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 人上皮樣細胞;BEAS-2B嘧霉胺(分析標準品,98.5%)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98.5%Pyrimethanil

CM-H087人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL甜菜寧(分析標準品,99%)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99%Phenmedipham
DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-shēng huà shì jì容量：RT5克

肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)-2,4-二腙 e- 2,4-DNPH solution (HPLC,>98.0%) 1567-89-1 1G 通用試劑

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記) 小鼠骨骼成纖維細胞，BLO-11細胞 RM-1(細胞)L-脯安醋隊肖基本安三拂醋鹽 H-PRO-PNc TFc 10831-19-3

人癌細胞;SK-BR-3Myokinase肌激酶5克BR，10%

AGRP Others Human 人 AgRP / AGRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 140-22-7二本基羰酰二1,5-Dipxenylcarbazide
申克孢子細菌探針法熒光定量PCR試劑盒L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2蘭索拉唑砜Lansoprazole Sulfone質(zhì)量規(guī)格：美國進口

Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100mlN-去甲基羅紅霉素N-Demethyl Roxithromycin質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人表皮色素細胞-淺色素RNAHEM-l miRNA5 μg外消旋鹽酸舍曲林-d3rac Sertraline-d3 Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人細胞裂解液 (陽性對照) (1S,4R)-N-去甲基鹽酸舍曲林(1S,4R)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人臍動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL(1R,4S)-N-去甲基鹽酸舍曲林(1R,4S)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。