實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠αL巖藻糖苷酶elisa試劑盒 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Bis(4-bromophenyl)acetylene 中文名：二(4-溴苯基)乙炔 分子式：C14H8Br2 度：98.0%

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 中文名：雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來基苯基)甲烷 分子式：C27H26N2O4 度：98.0%

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Doxapram  monohydrate 中文名：鹽酸多沙普侖 分子式：C24H33ClN2O3

小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa試劑盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Bis(4-bromophenyl)acetylene 中文名：二(4-溴苯基)乙炔 分子式：C14H8Br2

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 中文名：雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來基苯基)甲烷 分子式：C27H26N2O4
小鼠細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鋁試劑質(zhì)量規(guī)格：ACSAluminon

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus酸性鉻藍(lán)K質(zhì)量規(guī)格：指示劑級(jí)Acid chrome blue K

ACVR1B Others Human  ALK4 / ACVR1B 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 富馬酸喹硫平質(zhì)量規(guī)格：>99%Quetiapine Fumarate

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0919富馬酸喹硫平（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Quetiapine Fumarate

SIAE Others Human  sialate O-acetylesterase / SIAE 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雷特格韋鉀質(zhì)量規(guī)格：含量>98.5%,BRRaltegravir K
Hepa 1-6細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0923伏格列波糖（標(biāo)準(zhǔn)品）Voglibose質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

CCL8 Protein Human 重組 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)琥珀酸甲潑尼龍（標(biāo)準(zhǔn)品）Methylprednisolone hemisuccinate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

SK-Hep-1(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL17RD 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 六甲蜜胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Altretamine質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

胚;MRC-5甲氧氯普胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Metoclopramide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 奧扎格雷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Ozagrel 質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用
Neutral berberine sulfate  中文名：硫酸黃連素 分子式：C20H20NO8S 度：98.0% 小鼠凋亡相關(guān)因子elisa試劑盒 小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒、小鼠凋亡相關(guān)因子eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Pefloxacin mesylate  中文名：甲磺酸培氟沙星 分子式：C18H24FN3O6S 度：98.0% 小鼠第八因子相關(guān)抗原elisa試劑盒 小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒、小鼠第八因子相關(guān)抗原eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ethopabate  中文名：乙氧酰胺苯甲酯 分子式：C12H15NO4 度：99.0% 小鼠促卵泡素elisa試劑盒 小鼠促卵泡素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促卵泡素試劑盒、小鼠促卵泡素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

N拉沙熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）icarbazin  中文名：尼卡巴嗪 分子式：C19H18N6O6 度：99.0% 小鼠促甲狀腺素釋放激素elisa試劑盒 小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒、小鼠促甲狀腺素釋放激素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ketoprofen   分子式：C16H14O3 度：99.0% 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝