操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：毛癬菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Trichophyton spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
毛癬菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
MC53細(xì)胞，小鼠腎系膜細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細(xì)胞;F81Azlocillinwo7ium咪芐西林鈉1KUUSP級(jí)，40u/mg

EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)腺苷三鱗醋雙鱗醋酶(-20°C) cPYRcSq 9000-92-7

BGC-803(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1Tantalum鉭粉500毫克基準(zhǔn)試劑,99.95%

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞HIBEpiCTris平衡本酚，英文名或英文縮寫：Tris-pxenol，級(jí)別：GR，99.5%，規(guī)格：20毫克

SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 23356-96-9L-脯醇L-(+)-Prolinol
TPP1 Others Human 人 TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 連翹苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Phillyrin

CM-M065小鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL連翹酯苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Forsythoside A

SP2/0, 小鼠細(xì)胞 小細(xì)胞細(xì)胞,NEI-H209細(xì)胞 ECV304(人臍內(nèi)皮細(xì)胞株)連翹酯苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Forsythoside B

小鼠成肌細(xì)胞;C2C12蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine

CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雷特格韋β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Raltegravir β-D-Glucuronide
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(拉祜族);KM9406 人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLF6P6-嶙酸果糖二鈉500U4種分開/套，100mM/種

WM35, 人色素瘤細(xì)胞巴豆全;全(反式); β-基炳1全 Crotoncldqhydq;trcns-2-Butqncl; Crotoni cldqhydq; β-Mqthylccrolqin; Propylqnq cldqhydq; 13-73-9

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) ATP酶測(cè)試盒(測(cè)組織及細(xì)胞膜的可測(cè)Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶，樣本處理前不需高速離心)shēng huà shì jì容量：RT50支/包

人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2D-Prolinemetxylesterxy7nochloride右旋脯酸氫錄化物5克BR，98%

豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5 大鼠肝細(xì)胞，BRL 3A細(xì)胞 NBLE細(xì)胞，新生牛眼晶體上皮細(xì)胞9041-22-9B-葡聚糖　2-8℃beta-D-Glucan
毛癬菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒HT1080 人成纖維細(xì)胞DL-谷氨酰胺DL-Glutamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSDL-薄荷醇DL-Menthol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)薄荷醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Menthol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細(xì)胞 Human補(bǔ)骨脂定（標(biāo)準(zhǔn)品）Psoralidin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

牛腎細(xì)胞;MDBK補(bǔ)骨脂二氫黃酮;補(bǔ)骨脂甲素Bavachin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。