實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 50g  3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  92282-70-7 中文名：3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇 分子式：C21H36O3 度：98.0%

生長(zhǎng)因子 英文名稱： Human Growth Factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： GF  3-O-Benzyl estrone  858-98-0 中文名：3-O-芐基雌酚酮 分子式：C25H28O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：

生長(zhǎng)相關(guān)因子 α(GRO α) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Pentoxyverine   23142-01-0 中文名：枸櫞酸噴托維林 分子式：C26H39NO10 度：98.0%

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生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因a 英文名稱： growth-regulated oncogene a 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： GRO a  3-O-Acetylandrostenone hydrazone  122914-94-7 中文名：3-O-乙酰基雄酮腙 分子式：C21H32N2O2 度：98.0%
SERPINI1 Others Human  SERPINI1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 十四烷(Standard for GC,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)Tetradecane

病毒N9亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-11酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5%Tributyl phosphate

ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 熒光桃紅B,酸性紅92質(zhì)量規(guī)格：ARPhloxine B

CL-0017A673(橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2依萊鉻紅B質(zhì)量規(guī)格：AREriochrome Red B

QBC-939, 細(xì)胞 (瘤株),Ke-3細(xì)胞 HL-60(急性粒細(xì)胞細(xì)胞)固紅RL質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRFast Red RL Salt
BE(2)-M17(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317氯羥喹（標(biāo)準(zhǔn)品）Clioquinol質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定

*成纖維細(xì)胞HCF硫酸沙丁胺醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Albuterol sulfate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫酸普拉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Dehydroepiandrosterone-3-sulfate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

大鼠腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL撲米酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Primidone質(zhì)量規(guī)格：檢查

SUP-B15Ph+急淋細(xì)胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS葡萄糖酸鋅（標(biāo)準(zhǔn)品）Zinc gluconate質(zhì)量規(guī)格：檢查
Tenacigenoside A  中文名： 分子式：C35H56O12 度：% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Daturataturin A aglycone  中文名： 分子式：C28H38O5 度：93.0% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名： 分子式：C29H46O2 度：% 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Oleandrin  中文名： 分子式：C32H48O9 度：98.0% 兔內(nèi)皮素（Endothelin-1）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β-Anhydrouzarigenin 中文名： 分子式：C23H32O3 度：97.0% 兔內(nèi)皮抑素(rabbit ES) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝