產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Vibrio choleraeO139
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
SGC-7901 人細胞R-聯(lián)萘酚1酸酯質量規(guī)格：>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate

CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤質量規(guī)格：>97%,原裝進口2,6-Dichloropurine

mCF, 小鼠成纖維細胞2,4-二氯喹唑啉質量規(guī)格：>98%2,4-Dichloroquinazoline

人胚腎上皮細胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氯甲基蒽質量規(guī)格：>98%，進口原裝9-(Chloromethyl)anthracene

人纖維細胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))質量規(guī)格：>97.0%(GC)1-Bromoanthracene
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Valacyclovir HCl

人表皮色素細胞-淺色素總RNAHEM-l NA維庫溴銨質量規(guī)格：>99%,BRVecuronium Bromide

RT4細胞，細胞 人胚肺細胞,MRC-5細胞 原代平滑肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml維庫溴銨（標準品）質量規(guī)格：>99%,標準品Vecuronium Bromide

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4GDPNa2;5’-二1酸鳥苷二鈉質量規(guī)格：>90%,BRGDP Di Salt

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) SU11274質量規(guī)格：>98%,選擇性的Met抑制劑SU-11274
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) 油醇，英文名或英文縮寫：Terpineol，級別：AR，99%，規(guī)格：500克

小鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7

P9小鼠骨髓基質細胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS化四甲基，英文名或英文縮寫：Tetrametxylammonium iodide，級別：AR，98%，規(guī)格：1克

白細胞介素-12超家族β-酸乙酯鹽酸鹽10克RT

SW 1353(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠細胞)pxenmetxosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)1,5-二溴蒽(>97.0%(GC))1,5-Dibromoanthracene質量規(guī)格：>97.0%(GC)

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))1,8-Diiodoanthracene質量規(guī)格：>98.0%(GC)

獼猴肺細胞;MML29-酮基利培酮9-Keto Risperidone質量規(guī)格：美國進口

人氣管平滑肌細胞 (HTSMC)( 5×105 )6-去氟-6-羥基利培酮6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone質量規(guī)格：美國進口

CL-0260BC-021(人癌細胞)5×106cells/瓶×27-羥基利培酮7-Hydroxy Risperidone質量規(guī)格：美國進口