產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰輔酶A 內鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑

NCI-H358人非小細胞細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細結晶RTsigma

KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標簽)(甘油)
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細胞)梓醇（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Catalpol

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Shikonin

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 紫草酸（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Lithospermic acid

人內皮細胞裂解物HLECL紫丁香酚苷（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Syringin

A2780/Taxol細胞，人紫杉醇耐藥株 鼠腹水單核細胞瘤,J774A.1細胞 組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml竹節參皂苷IVa（標準品）質量規格：供含量測定用chikusetsu saponin Iva
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞錄化亞銻，英文名或英文縮寫：Antimony(III)chloride，級別：CP，規格：10克

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化鎢銨 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用試劑

大鼠嗅鞘細胞完全培養基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2

DH82狗腎惡性癥細胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS曙紅Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克

IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
性大腸埃希氏菌五重探針法熒光定量PCR試劑盒P3X63Ag8.653細胞，細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內皮細胞完全培養基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質量規格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK伊立替康標記物d10Irinotecan Labeled d10質量規格：美國進口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-O-甲基-d3-鳥嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質量規格：美國進口

口腔角質細胞培養基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質量規格：美國進口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride質量規格：美國進口