操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：核桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
核桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2白當(dāng)歸素(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Byakangelicin

C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30白果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品(?)-Bilobalide

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1白花前胡醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Peucedanol

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 環(huán)杷明;環(huán)巴胺;去氧芥芬胺(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品;Hh信號(hào)通路拮抗劑,作用于SmoCyclopamine

人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧昔布寧N氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Oxybutynin N-Oxide
R9[PR9]小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 R9[PR9] mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+5uM 吉非替尼利福平；利發(fā)霉素質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Rifampicin

IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白利福平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rifampicin

SW 780(人膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人細(xì)胞)泮托拉唑鈉1.5水合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPantoprazole Sesquihydrate

CM-M099小鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品Pantoprazole Sesquihydrate

IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR(s)-10-hydroxycamptothecin
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元BOC-D-ProlineN-叔丁氧羰基-D-脯酸5克BR，99%

TF Others Sus scrofa (Pig) 野豬 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-本氧醇 2-Phqnoxyqthcnol 1-99-6

大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLAzureIIeosinⅡ號(hào)天青伊紅100毫克生物技術(shù)級(jí)，98%

UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1 chicken embryo fibroblast DMEM培養(yǎng)基+10%FBS十四烷基基溴化50克

IFNW1 Protein Human 重組人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(派洛寧B)
核桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒NK-92MI細(xì)胞，人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞,HepG2.2.15細(xì)胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×27-羥基甲氨蝶呤7-Hydroxy Methotrexate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-218-羥基甲氨蝶呤-d37-Hydroxy Methotrexate-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5'-O-三苯甲基胸苷Trt-dT質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

角臘上皮細(xì)胞生長添加物CEpiCGS5'-DMT-5--2'-脫氧尿苷DMT-5-I-dU質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DMT保護(hù)性-2'-氟脫氧尿苷DMT-2'-F-dU質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。