PCR實驗方法步驟：
熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人小細胞;NCI-H2227N',N-二甲基甘氨酸鹽酸鹽(>98%,BR)質量規格：>99%,BRN-N-Dimethylglycine hydrochloride

TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)質量規格：>98%,BCn-Nonyl-beta-D-maltopyranoside

山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1正辛基-beta-D-麥牙糖苷(>98% (HPLC),BC)質量規格：>98% (HPLC),BCn-Octyl-b-D-maltopyranoside

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) 壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)質量規格：>98%,BCNonyl β-D-glucopyranoside

HuTu-80 人十二指腸腺癌細胞N-芐基甘氨酸鹽酸鹽質量規格：美國進口N-Benzylglycine hydrochloride
OPM-2-UBC-EGFP(穩定株)人細胞 OPM-2-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活)3-(*基硅基)-1-丙磺酸鈉(>98.0%(T))質量規格：>98.0%(T) 3-(Trimethylsilyl)-1-propanesulfonate

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Ierleukin-17F 蛋白 (His 標簽)二甲基硒(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)Dimethylselenide

人雪旺細胞 ( HSC) ( 5×105 ) 小鼠神經干細胞 Mouse度他雄胺質量規格：>99%,BRDutasteride

CM-H089人髂動脈內皮細胞完全培養基100mL度他雄胺(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Dutasteride

IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) 依達拉奉質量規格：>98.5%Edaravone
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-IL-SERINEL-絲酸美國藥典級25G56-45-1RT

HPX Others Human 人 HPX / Hemopexin 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羧基醌 cNTHRcinoneONq-2-CcRBOXYLIC cCID 117-78-

EC109，人細胞Oleicacid順式-9-十八1酸1克AR，99%

CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D-正纈酸10克RT

人胚肺二倍體細胞;KMB-17(直鏈淀粉)
熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽性對照) 托法替尼;CP-690550Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib) 質量規格：>98%，JAK3抑制劑

髓母細胞瘤組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml1-萘乙酸(NAA)；α-萘乙酸1-Naphthylacetic acid質量規格：>98%,Suitable for plant cell culture

SW13細胞，人腎上腺皮質瘤 人癌細胞,BT-549細胞 溶液AMS3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)Indoxyl-Gal質量規格：>98%(TLC),BR

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-73-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環已胺鹽(>98%(HPLC),BR)Indoxyl-Glucuronide質量規格：>98%(HPLC),BR

IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細胞裂解液 (陽性對照) 代苯(>98%,醫藥級)Iodobenzene質量規格：>98%,醫藥級

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。