實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

胰蛋白酶抑制劑   10g  Polyphyllin D  50773-41-6  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

胰蛋白酶檢測   Alkaline phosphatase (AKP) detection  Polypodine B  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8  度：97.5%

胰蛋白酶測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣  Tetracaine   136-47-0  中文名：鹽酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

胰蛋白酶測定試劑盒（紫外比色法）                    Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  153012-37-4  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2 

胰蛋白酶1:250   250g  Polyphyllin D  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16  度：98.0%
FCGR3A Others Human  CD16a / FCGR3A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟啶酮(>98%,植物激素級)質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級Fluridone

大鼠腦細(xì)胞;C6組胺(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCHistamine

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 胰酶(1:4500)質(zhì)量規(guī)格：酶活1:4500,BRPancreatin

上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君質(zhì)量規(guī)格：>98%,BROrphenadrine

TSCCA細(xì)胞，舌鱗癌細(xì)胞系 乙型副傷寒沙門氏菌 化大家鼠;NRmβ-半乳糖苷酶質(zhì)量規(guī)格：700u/mg，羅氏分裝β-Galactosidase
成細(xì)胞;Saos-2 脈絡(luò)膜微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL龍膽苦苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Gentiopicroside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA蘆薈苷AAloin質(zhì)量規(guī)格：>85%,BR

DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Aloin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠Lewis瘤株;LLT蘆薈寧（標(biāo)準(zhǔn)品）Aloenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6 II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL蘆竹堿Gramine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Atractylodin  中文名：蒼術(shù)素  分子式：C13H10O    紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒（比色法）

Atorvastatin calcium  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5    銅－ATP酶（Cu-ATPase）測定試劑盒（比色法）                 

Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    總谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）測定試劑盒（微板法）

Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O    酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）

Aspartame  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5    抗酸性0酸酶（SACP）試劑盒（比色法）

質(zhì)粒PET32a本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。