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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    病毒通用RT-PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):BK-P64577
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-06
    • 更新日期: 2025-11-12
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號(hào) BK-P64577
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號(hào)
    是否進(jìn)口

    公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號(hào)

    病毒通用RT-PCR試劑盒

    50

    BK-P64577

    PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
    公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2
    、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
    2.
    標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

    實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
    1
    RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    豬細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   豬細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T     Shikonin  中文名:紫草素  分子式:C16H16O5  度:99.0%

    豬病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒   48T/96T   試劑盒   組裝/原裝           Shikimic acid  138-59-0  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5 

    豬病毒(HEV)*試劑盒(-PCR)   48T  Shiraiachrome A  中文名:  分子式:C30H26O10  度:%

    病毒抗體elisa試劑盒   病毒抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T     Shikonin  中文名:紫草素  分子式:C16H16O5 

    病毒(CSFV)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Stigmasta-4,25-dien-3-one  848669-08-9  中文名:  分子式:C29H46O
    草魚腎細(xì)胞;GIK順鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cisplatin

    HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 克拉曲濱,克拉利賓質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Cladribine

    CL-0262BE(2)-M17(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2西地尼布馬來(lái)酸鹽質(zhì)量規(guī)格:度> 99%Cediranib Maleate

    HCC細(xì)胞,高分化鱗癌細(xì)胞 T瘤細(xì)胞Jurkat亞系,Jurkat77細(xì)胞 癌細(xì)胞;MDA-MB-157西他列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRSitagliptin

    786-O(腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀;維格列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRVildagliptin
    腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品)Lamotrigine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

    LILRA3 Others Human  ILT6 / LILRA3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-半乳糖醛酸D-Galacturonic acid質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,97%,一水

    新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTFD-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galacturonic acid質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定;一水物

    HCT-15細(xì)胞,結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,OCM-1細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo骨化三醇Calcitriol質(zhì)量規(guī)格:度≥98%,BR

    Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2坎地沙坦酯Candesartan cilexetil質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
    Peri acid  中文名:周位酸  分子式:C10H9NO3S    人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Perforatumone  中文名:  分子式:C35H52O5    人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

    Pentoxyverine   中文名:枸櫞酸噴托維林  分子式:C26H39NO10    中文名稱   方法   規(guī)格

    Pentagalloylglucose  中文名:五沒食子酰葡萄糖  分子式:C41H32O26    人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    病毒通用RT-PCR試劑盒Pemetrexed di  中文名:培美曲塞二鈉  分子式:C21H23N5Na2O6    人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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