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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    LP1細胞
    • 品牌:帛科
    • 產地:進口、國產
    • 貨號:E0597
    • 價格: ¥1610/株
    • 發布日期: 2020-10-07
    • 更新日期: 2025-11-13
    產品詳請
    產地 進口、國產
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 E0597
    用途 公司產品僅用于科研
    組織來源 骨髓瘤;女性
    細胞形態 詳見說明書
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態 貼壁
    物種來源
    包裝規格 1×106
    純度 詳見說明書%
    是否進口

    注意事項:
    1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時*戴上手套操作。
    2.
    不宜將凍存細胞放置在0-60這一溫度范圍內過久,低溫損傷主要發生在這一溫度區內,是危險溫區
    3.
    注意定期檢查液氮罐內液氮量,及時添加。

    產品名稱

    LP1細胞

    單位

    T25/

    貨號

    E0597

    產品簡稱:LP1細胞
    中文名稱:人細胞

    規格:1×106

    種屬:人

    來源:;女性

    培養基:1640

    狀態:懸浮

    單位:T25/

    貨號:E0597

    細胞的凍存:
    1.先將凍存管放入4冰箱,約40min
    2.
    接著置于-20冰箱,約30-60min
    3.
    置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
    4.
    置于液氮罐中長期保存。
    5
    產品僅用于科研同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

    具體步驟:
    LP1細胞. 水的制備:
    帛科細胞培養用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
    .PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:HanksD-Hanks液的配制)
    1.
    溶解定容:將藥品(NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4·H2O 1.56gKH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
    2.
    移入溶液瓶內待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內,蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發掉的水份。
    . 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
    胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH8.0、溫度為37時,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+Mg2+BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
    1.
    稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH7.2左右)或PBSD-hanks)液中。攪拌混勻,置于4內過夜。
    2.
    用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20保存以備使用。

    細胞計數:
    1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數槽上。
    2.
    制備計數用的細胞懸液:用吸管吸5滴細胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍染液(0.4%)或苯胺黑,活細胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區別活細胞和死細胞。
    3.
    將細胞懸液滴入計數板:將待測細胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
    4.
    統計四個大格的細胞數:將血球計數板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數板,當看到鏡中出現計數方格后,數出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細胞數目。
    5.
    計算原細胞懸液的細胞數:按照下面公式計算細胞密度:
    (細胞懸液的細胞數)/ml 四個大格子細胞數/4) ×2×104
    說明:公式中除以4因為計數了4個大格的細胞數。
    公式中乘以2因為細胞懸液于染液是11稀釋。
    公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為:
    1.0mm
    (長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 1ml1000mm3

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