產品簡稱：KYSE270細胞
中文名稱：人食管鱗癌細胞

規格：瓶

種屬：人

來源：食管鱗癌；男性

培養基：1640

狀態：貼壁

單位:

貨號：E0545

帛科細胞培養器材的選擇：從培養量大小來講，從小到大有細胞培養板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養瓶、細胞工廠等，更大就是反應器了。

帛科細胞培養瓶培養面積從25-225平方厘米不等，一般都經過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規模培養時用（如單克隆細胞的培養等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產品僅用于科研
細胞培養的具體步驟和注意事項：
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預熱的DMEM完全培養基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養箱中培養。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養的一段時間，非細胞有絲分裂次數）時，去掉完全培養基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養基終止胰蛋白酶消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養箱繼續培養。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養箱中約2-3min。加入DMEM完全培養基終止胰蛋白酶消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內（管內有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。
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3',5'-二羥基苯乙酮(>98.0%(GC))  3',5'-Dihydroxyacetophenone  質量規格：>98.0%(GC) 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測試劑盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T

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3,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC))  3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol  質量規格：>98.0%(GC) 英文名稱MouseLBPELISAKit小鼠脂多糖結合蛋白(LBP)規格：96T/48T

3,5-二甲氧基芐(>96.0%(GC))  3,5-Dimethoxybenzyl Bromide  質量規格：>96.0%(GC) PH2-3顯色(CRESOLRED)指示溶液50毫升

3,5-二-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC))  3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene  質量規格：>97.0%(GC) Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒豬轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

3',5'-二-4'-羥基苯乙酮(>97.0%(GC))  3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone  質量規格：>97.0%(GC) 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 ，英文名： CA ELISA Kit

3,5-二羥基苯甲酰胺(>98.0%(HPLC)(N))  3,5-Dihydroxybenzamide  質量規格：>98.0%(HPLC)(N) 大鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒RatHexokinase,HKELISAKit 96T/48T

 3,5-二芐氧基(>98.0%(GC))  3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde  質量規格：>98.0%(GC) 人白介素-1β前體(Pro-IL-1β)試劑盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit

六  Hexaphenylbenzene  質量規格： 92.40-97.20 %(碳元素分析) 英文名稱MouseLPSELISAKit小鼠脂多糖(LPS)規格：96T/48T

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人臍動脈內皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg硫酸異帕米星質量規格：含量≥670μg/mgIsepamicine Sulphate

G401細胞，人Wilms細胞 大鼠垂體細胞,RPC細胞 CL-0462UMR-106(大鼠細胞)5×106cells/瓶×2蓓薩羅丁;貝沙羅汀質量規格：>99%Bexarotene

HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2氯前列醇鈉(D型）質量規格：>98.5%D-Cloprostenol

hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD133+-CB)，單一捐獻者 100000 大鼠垂體細胞RPC氯前列醇鈉(DL型）質量規格：>98.5%,USP34DL-Cloprostenol

CSC, 小鼠心肌細胞鹽酸川芎嗪(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Ligustrazine HCl
KYSE270細胞C6, 大鼠腦細胞H-89(PKA抑制劑)質量規格：>98%,10mg/ml,進分H-89 2HCl

FCGRT & B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 夫西地酸質量規格：>97%,BRFusidine

大鼠腦內皮細胞完全培養基 100mL夫西地酸(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Fusidine

LLC-PK1豬腎近曲小管上皮細胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS3--L-酪氨酸質量規格：>98%,BR3-Iodo-L-tyrosine

IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標簽)鹽酸雙環胺（標準品）質量規格：供TCL鑒別用DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE
注意事項：
KYSE270細胞（1）預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱；
（2）用75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養細胞形態的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。