基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 大鼠肺平滑肌細胞直銷
簡稱：RPVSMC

種屬：大鼠

來源：肺；平滑肌

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE01543

使用方法：
收到細胞大鼠肺平滑肌細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

(R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮  分子式：C10H11NO2    小鼠總膽固醇   英文名稱：   Mouse Total Cholesterol   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TC

(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名：(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO    小鼠壞死因子   英文名稱：   Mouse Total Tumor Necrosis Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TNF

(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  中文名：(R)-(+)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚  分子式：C20H14O2    小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體   英文名稱：   Mouse ansferrin Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TFR

(R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-(-)-4-芐基-3-丙酰基-2-惡唑烷酮  分子式：C13H15NO3    小鼠轉(zhuǎn)移趨化生長因子β   英文名稱：   Mouse ansforming Growth Factor β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGFβ

(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol  中文名：  分子式：C30H50O    小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β2(mouse TGF-β2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝
小鼠緊張素原(aGT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Convallagenin B  中文名：鈴蘭皂苷元B  分子式：C27H44O6 

小鼠緊張素II(mouse ANG II)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  3483-82-7  中文名：N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯  分子式：C18H19NO4 

小鼠緊張素elisa試劑盒   小鼠緊張素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠緊張素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠緊張素試劑盒、小鼠緊張素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate  150058-27-8  中文名：  分子式：C11H12N2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl 2,2-dithienylglycolate  中文名：  分子式：C11H10O3S2 

小鼠緊張素Ⅱ   英文名稱：   Angiotensin Ⅱ   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANGⅡ  Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  中文名：  分子式：C22H17N3O4  度：98.0%
Amisulpride  71675-85-9  中文名：阿米舒必利  分子式：C17H27N3O4S    is,   500g

5-Amino-2-methylindole  7570-49-2  中文名：5-氨基-2-甲基吲哚  分子式：C9H10N2    曲拉通X-100   100ml

9-Anthracenylmethyl acrylate  31645-34-8  中文名：丙烯酸-9-蒽甲酯  分子式：C18H14O2    itonX-100   250ml              

Spongouridine  3083-77-0  中文名：阿苷  分子式：C9H12N2O6    病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

2-Aminothiazol-4-acetic acid  29676-71-9  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S    麻風(fēng)桿菌(ML)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
大鼠肺平滑肌細胞直銷葡萄糖（Glu）測試盒   Surface aigen (enzymatic method) test case  p-Anisoin  119-52-8  中文名：對茴香偶姻  分子式：C16H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

蘋果酸脫氫酶測試盒（測血清）   Apple acid dehydrogenase test case (Ce Xueqing)                 3-Acetylcoumarin  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3 

旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β   英文名稱：   Platelet-derived growth factor receptor beta   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PDGF Rβ  Periplocin  13137-64-9  中文名：杠柳毒苷  分子式：C36H56O13 

(Pm)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Norfloxacin lactate  97867-34-0  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

凝血酶敏感蛋白-1   英文名稱：   thrombospondin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TSP-1  Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S