使用方法：
收到細(xì)胞大鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 大鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：RBMEC

種屬：大鼠

來(lái)源：腦微；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0780

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

19-Nortestosterone acetate  1425-10-1  中文名：19-去甲睪酮乙酸鹽  分子式：C20H28O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠腦肽(mouse BNP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

17β-Hydroxy-17-methylandrosta-4,9(11)-dien-3-one  1039-17-4  中文名：17β-羥基-17-甲基雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮  分子式：C20H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠N端前腦素(mouse -proBNP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  19041-66-8  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3  度：98.0%      小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13  度：%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠白介素-27   英文名稱：   ierleukin-27   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-27  Canrenone  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3 

小鼠白介素-23(mouse IL-23)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Catalponol  34168-56-4  中文名：  分子式：C15H18O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  梓; 四氫萘酮; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Catalpalactone  1585-68-8  中文名：  分子式：C15H14O4  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠白介素23(IL-23)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Catalponol methylthiomethyl ether  1432057-74-3  中文名：  分子式：C17H22O2S 

小鼠白介素-23   英文名稱：    ierleukin-23   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-23  Canrenone  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3  度：98.0%
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測(cè)試劑盒   48T                 Roflumilast  162401-32-3  中文名：羅氟司特  分子式：C17H14Cl2F2N2O3 

豬髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   豬髓0脂堿性蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬髓0脂堿性蛋白試劑盒、豬髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Sitafloxacin  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3  度：98.5%

豬髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Sibiricose A1  139726-40-2  中文名：6'-芥子酰基蔗糖  分子式：C23H32O15 

豬髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Stigmastane-3β,5α,6β-triol  中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式：C29H52O3  度：96.5%

豬水通道蛋白4（AQP4）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sitagliptin phosphate  中文名：無(wú)水磷酸西他列汀  分子式：C16H18F6N5O5P  度：98.0%
大鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Prosapogenin A  中文名：薯蕷次皂苷A  分子式：C39H62O12  度：%  兔熱休克蛋白70elisa試劑盒   兔熱休克蛋白70試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔熱休克蛋白70試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名：  分子式：C46H72O17  度：%  兔熱休克蛋白40elisa試劑盒   兔熱休克蛋白40試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔熱休克蛋白40試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Dehydroepiandrosterone  中文名：脫氫表雄酮  分子式：C19H28O2  度：99.0%  兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Gracillin  中文名：纖細(xì)薯蕷皂苷  分子式：C45H72O17  度：98.0%  兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.5%  兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。