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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P64566
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-26
    • 更新日期: 2025-11-12
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64566
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進(jìn)口

    公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

    50

    BK-P64566

    PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實(shí)時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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    FCGR3 Others Mouse 小鼠 FCGR3 / CD16 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 咪唑立賓質(zhì)量規(guī)格:>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級Mizoribine

    大鼠肝細(xì)胞;IAR20鹽酸美西律(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Mexiletine

    REG4 Others Rat 大鼠 REG4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 美洛西林鈉質(zhì)量規(guī)格:>96%,CP,BRMezlocillin

    平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL美洛西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Mezlocillin
    絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞 Human硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素Amikacin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量674-786ug /mg,USP30

    EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸阿米卡星(標(biāo)準(zhǔn)品)Amikacin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:效價測定

    無色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC兩性霉素BAmphotericin B質(zhì)量規(guī)格:>750ug /mg,USP,細(xì)胞培養(yǎng)級

    NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)兩性霉素B(標(biāo)準(zhǔn)品)Amphotericin B質(zhì)量規(guī)格:含量測定

    恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2醋酸增素Angiotensin Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
    Neutral berberine sulfate  中文名:硫酸黃連素  分子式:C20H20NO8S    中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶   英文名稱:   Neuophil elastase   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NE

    Neritaloside  中文名:  分子式:C32H48O10    神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NF

    Neridienone B  中文名:  分子式:C21H28O4    神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NF

    Neoprzewaquinone A  中文名:  分子式:C36H28O6    核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB   英文名稱:   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NF-KB

    病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒Neochlorogenic acid methyl ester  中文名:新綠原酸甲酯  分子式:C17H20O9    中性粒細(xì)胞防御素   英文名稱:   Neuophil Peptide-1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   HNP-1

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