使用方法：
收到細(xì)胞人特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人特價(jià)
簡(jiǎn)稱：HPF

種屬：人

來(lái)源：肺；成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0934

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2    口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T              

4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2    鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T

4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS    鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測(cè)試劑盒   48T

4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  中文名：  分子式：C12H15N3O    鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T

4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S    鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測(cè)試劑盒   48T
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白elisa試劑盒   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Linagliptin  中文名：利拉利汀  分子式：C25H28N8O2 

小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  N-Boc-O-Benzyl-D-serine  中文名：N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸  分子式：C15H21NO5 

小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒   小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  N-Benzylmaleimide  中文名：N-芐基馬來(lái)  分子式：C11H9NO2  度：98.0%

小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  N-Boc-O-Benzyl-D-serine  47173-80-8  中文名：N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸  分子式：C15H21NO5  度：98.0%   

小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒   小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  N-Benzylmaleimide  中文名：N-芐基馬來(lái)  分子式：C11H9NO2
2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline  109113-72-6  中文名：  分子式：C10H9ClN2    兔6素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-(Boc-Amino)piperidine  309956-78-3  中文名：  分子式：C10H20N2O2    兔素B2(TXB2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Linagliptin  668270-12-0  中文名：利拉利汀  分子式：C25H28N8O2    兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

Telmisartan tert-butyl ester  144702-26-1  中文名：  分子式：C37H38N4O2    兔血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Fluoronaphthalene  321-38-0  中文名：  分子式：C10H7F    吐溫80   100ml
人特價(jià)人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  15873-25-3  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3  度：98.0%   

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3 

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3  度：98.0%

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子αelisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3 

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one  5751-20-2  中文名：  分子式：C5H6N2OS  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。