使用方法：
收到細胞人宮頸上皮永生化細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 人宮頸上皮永生化細胞現貨供應
簡稱：H8

種屬：人

來源：宮頸；上皮細胞；永生化

培養基：1640

狀態：貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0492

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5    堿性0酸酶（AKP）檢測   Acid phosphatase (ACP) detection

5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3    酸性0酸酶（ACP）檢測   Prostate acid  enzyme (PACP) detection

5-Aminouracil  中文名：5-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2    酸性0酶（PACP）檢測   Glamine syhetase (GS) detection              

5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3    胰蛋白酶1:250   250g

5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2    ypsin1:250,PorcinePancreas   25g
胸苷酸合成酶   英文名稱：   thymidylate syhase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TS  Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%  關鍵詞： 

性激素結合球蛋白   英文名稱：   Sex Hormone Binding Globulin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   SHBG  O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3  度：98.0%

型脂肪酸結合蛋白   英文名稱：   Human hea Fatty Acid Binding Protein   規格：   48T/96T   英文縮寫：   hFABP  n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2  度：%

鏈球菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Norfloxacin lactate  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6  度：98.0%

新霉素   5g  Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關鍵詞：
Decoquinate  18507-89-6  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5    兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Quinocetone  81810-66-4  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3    兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2    兔睪(rabbit TESTO)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O    兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S    兔調節蛋白(rabbit TM)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
人宮頸上皮永生化細胞現貨供應乳酸（lacticacid）測定試劑盒（測血清、組織等）（比色法）  Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6  度：98.0%  關鍵詞： 

肉毒桿菌(E/F型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6 

肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  關鍵詞： 

溶酶體相關膜蛋白3   英文名稱：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   規格：   48T/96T   英文縮寫：   LAMP3  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  36157-40-1  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS  度：98.0%  關鍵詞： 

溶菌酶標準品   Standard for lysozyme                 Ranitidine   66357-59-3  中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。