公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人黑色素細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：HEM

種屬：人

來源：黑色素細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01424
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人黑色素細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
6-Amino-1,3-dimethyluracil  6642-31-5  中文名：  分子式：C6H9N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  1068661-35-7  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19  度：97.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  43200-81-3  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

5α-Androstanedione  846-46-8  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠睪elisa試劑盒   小鼠睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠睪試劑盒、小鼠睪eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Decanedioic acid  中文名：  分子式：C10H18O4 

小鼠睪(T)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Daucosterol  474-58-8  中文名：胡蘿卜苷  分子式：C35H60O6  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  ; ; ; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物

小鼠睪   英文名稱：   testosterone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TESTO  Daturataturin A aglycone  904665-71-0  中文名：  分子式：C28H38O5  度：93.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Erlotinib   183319-69-9  中文名：鹽酸埃羅替尼  分子式：C22H24ClN3O4  度：98.0%   

小鼠高遷移率族蛋白elisa試劑盒   小鼠高遷移率族蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠高遷移率族蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠高遷移率族蛋白試劑盒、小鼠高遷移率族蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Decanedioic acid  111-20-6  中文名：  分子式：C10H18O4  度：%  關(guān)鍵詞：  脂類; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Ponasterone A  13408-56-5  中文名：坡那甾酮A  分子式：C27H44O6    humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember3,EAR3ELISA試劑盒人嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Stigmasta-5,8-dien-3-ol  570-72-9  中文名：  分子式：C29H48O    組織PKG-Iβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Tenacissoside F  928151-78-4  中文名：通關(guān)藤苷F  分子式：C35H56O12    Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ergosterol peroxide  2061-64-5  中文名：過氧化麥角甾醇  分子式：C28H44O3    兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one  19254-69-4  中文名：麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮  分子式：C28H40O    Human androgen receptor (AR) ELISA Kit 人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒
人黑色素細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Senkyunolide E  中文名：  分子式：C12H12O3  度：%  兔子球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4  度：%  兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Digalactosyldiacylglycerol  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15  度：%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  兔子可溶性調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。