公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷
簡稱：T84

種屬：人

來源：腺癌；肺轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0147
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2    磺酸 SHES   25g

9-Aminominocycline   中文名：  分子式：C23H29ClN4O7    Isicacidsalt   100g              

9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4    乙型   英文名稱：   Influenza B HA   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HA

9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴  分子式：C25H18O2    甲型H3N2HA1   英文名稱：   Influenza A H3N2 HA1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   H3N2 HA1

9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2    生長激素   英文名稱：   growth hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HGH
含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  Pemetrexed di  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C21H23N5Na2O6  度：98.0%

調(diào)節(jié)蛋白 (Thrombomodulin/sCD141)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國 Diaclone  Rosuvastain Calcium  中文名：瑞舒伐他汀鈣  分子式：C22H28FN3O6S 

素B2   英文名稱：   Thromboxane B2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TXB2  Pemetrexed  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C20H21N5O6  度：98.0%

素B2   英文名稱：   Human Thromboxanes B2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TXB2  Pefloxacin mesylate  70458-95-6  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S  度：98.0%   

素B2   英文名稱：   Human Thromboxane B2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TXB2  Pefloxacin mesylate  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  中文名：  分子式：C29H48O2  度：97.5%  兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dregeoside Da1  中文名：  分子式：C42H70O15  度：%  兔內(nèi)皮素-1(rabbit ET-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dehydroadynerigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H42O8  度：97.0%  兔纖維蛋白原降解產(chǎn)物(rabbit FDP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Cardenolide B-1  中文名：  分子式：C30H44O8  度：98.0%  兔促卵泡素(rabbit FSH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Drevogenin A  中文名：  分子式：C28H42O7  度：%  兔堿性成纖維生長因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷生存素 (survivin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Anthraflavic acid  中文名：二羥蒽醌  分子式：C14H8O4 

神經(jīng)營養(yǎng)素3   英文名稱：   Neuroophin-3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   -3  3-Hydroxychimaphilin  中文名：3-羥基梅笠草素  分子式：C12H10O3 

神經(jīng)營養(yǎng)素 4(-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   原裝進(jìn)口  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

神經(jīng)營養(yǎng)素 4(-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2 

神經(jīng)營養(yǎng)素 3(-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。