使用方法：
收到細胞人臍內皮（）細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 人臍內皮（）細胞直銷
簡稱：ECV304

種屬：人

來源：；女性

培養基：1640

狀態：貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0306

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名：  分子式：C19H26FN3O8  度：98.0%  關鍵詞：    線粒體解偶聯蛋白2   英文名稱：   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   規格：   48T/96T   英文縮寫：   UCP2

Capecitabine  154361-50-9  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6  度：98.0%  關鍵詞    小鼠細胞粘附分子-1   英文名稱：   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   VCAM-1

Canrenone  976-71-6  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠鳥酸脫羧酶   英文名稱：   Mouse Ornithine Decarboxylase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   ODC

Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名：  分子式：C25H22N6O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠卵清蛋白特異性IgE   英文名稱：   Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E   規格：   48T/96T   英文縮寫：   OVA sIgE

Candesartan ethyl ester  139481-58-6  中文名：  分子式：C26H24N6O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠氧化   英文名稱：   Mouse oxidized Low Density Lipoprotein   規格：   48T/96T   英文縮寫：   oxLDL
小鼠甲基化酶elisa試劑盒   小鼠甲基化酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠甲基化酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠甲基化酶試劑盒、小鼠甲基化酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Ergosterol peroxide  2061-64-5  中文名：過氧化麥角甾醇  分子式：C28H44O3 

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Donepezil   120011-70-3  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              cis-Octahydro-isoindole  中文名：  分子式：C8H15N 

小鼠己糖激酶elisa試劑盒   小鼠己糖激酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠己糖激酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Ketoprofen  22071-15-4  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3  度：99.0%   

小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Donepezil   120011-70-3  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3
Chrysophanol  481-74-3  中文名：大黃酚  分子式：C15H10O4    Humandopaminedecarboxylase,DDCELISA試劑盒人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9    組織NEK6激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Rubanthrone A  441764-20-1  中文名：  分子式：C17H14O10    HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Aloin  8015-61-0  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9    兔子內皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Aurantio-obtusin  67979-25-3  中文名：橙黃決明素  分子式：C17H14O7    People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E
人臍內皮（）細胞直銷Tanshinone IIB  17397-93-2  中文名：丹參酮IIB  分子式：C19H18O4  度：97.0%  關鍵詞：  神經保護; 抗氧化; 丹參; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Tanshinone IIA  568-72-9  中文名：丹參酮IIA  分子式：C19H18O3  度：98.5%  關鍵詞：  ; ; 丹參; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Tanshinone I  568-73-0  中文名：  分子式：C18H12O3  度：96.0%  關鍵詞：  ; ; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Sunitinib malate  341031-54-7  中文名：蘋果酸舒尼替尼  分子式：C26H33FN4O7  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Sulfaquinoxaline  59-40-5  中文名：磺胺喹噁啉  分子式：C14H12N4O2S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。