使用方法：
收到細胞人食管腺癌細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 人食管腺癌細胞直銷
簡稱：BIC-1

種屬：人

來源：食管腺癌；男性

培養基：DMEM

狀態：貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0935

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Diosgenin  512-04-9  中文名：薯蕷皂苷元  分子式：C27H42O3  度：98.0%  關鍵詞：  ; 雌激素劑; 黃山藥; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠17羥孕(17-OHP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dioscin  19057-60-4  中文名：薯蕷皂苷  分子式：C45H72O16  度：98.5%  關鍵詞：  溶血; 細胞毒; ; 薯蕷屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠乳酸脫氫酶   英文名稱：   Mouse Lactate Dehydrogenase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   LDH

Dinitolmide  148-01-6  中文名：二硝托胺  分子式：C8H7N3O5  度：98.0%      小鼠白三烯C4   英文名稱：   Mouse Leukoiene C4   規格：   48T/96T   英文縮寫：   LTC4

Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2  度：99.0%      小鼠脂蛋白酯酶   英文名稱：   Mouse Lipopeinlipase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   LPL

Dimethylolurea  140-95-4  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3  度：98.0%      小鼠白三烯   英文名稱：   Mouse leukoiene   規格：   48T/96T   英文縮寫：   LT3
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Nandrolone undecylate  862-89-5  中文名：十一酸諾龍  分子式：C29H46O3  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Epirengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4  度：98.0%

小鼠抗單核細胞抗體elisa試劑盒   小鼠抗單核細胞抗體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠抗單核細胞抗體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠抗單核細胞抗體試劑盒、小鼠抗單核細胞抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Epigoitrin  中文名：表告依春  分子式：C5H7NOS  度：98.5%

小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Epiandrosterone  中文名：表雄酮  分子式：C19H30O2  度：98.0%

小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Estradiol  50-28-2  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2
Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9    HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3,6'-Disinapoylsucrose  139891-98-8  中文名：3,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19    Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA試劑盒人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Triethyl   77-93-0  中文名：檸檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7    組織LYNA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名：α-硫辛酸  分子式：C8H14O2S2    Humanplaceagrowthfactor，PLGFELISAKit人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Polyhydroxybutyrate  26744-04-7  中文名：聚羥基丁酸酯  分子式：C12H20O7    兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食管腺癌細胞直銷Tetrahydrolachnophyllum lactone  56407-87-5  中文名：  分子式：C10H14O2  度：90.0%  關鍵詞：  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠抑制素B(INH-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracycline  60-54-8  中文名：四環素  分子式：C22H24N2O8  度：97.0%      小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracaine   136-47-0  中文名：鹽酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠促上皮質激素釋放激素(CRH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracaine  94-24-6  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。