使用方法：
收到細胞人小細胞細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人小細胞細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：NCI-H2227

種屬：人

來源：小細胞；男性

培養(yǎng)基：L15

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0953

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Emtricitabine  中文名：恩曲他濱  分子式：C8H10FN3O3S    豬(HYD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Empagliflozin  中文名：依帕列凈  分子式：C23H27ClO7    豬前列環(huán)素（PGI2）Elisa試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Emodin  中文名：大黃素  分子式：C15H10O5    豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GL2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Eleutheroside C  中文名：  分子式：C8H16O6    豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Edaravone  中文名：依達拉奉  分子式：C10H10N2O    豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
中文名稱   方法   規(guī)格  Alogliptin  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2  度：98.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8  度：98.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2 

中文名稱   方法   規(guī)格              Naftifine   65473-14-5  中文名：鹽酸萘替芬  分子式：C21H22ClN 

中文名稱   方法   規(guī)格              N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  1871-89-2  中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4
6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19  度：97.0%  兔子球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1,2,3,6-Tetra-O-galloyl-β-D-glucose  中文名：1,2,3,6-四-O-沒食子酰-β-D-葡萄糖  分子式：C34H28O22  度：98.0%  兔子球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Pentagalloylglucose  中文名：五沒食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26  度：98.0%  兔子球蛋白Gelisa試劑盒   兔子球蛋白G試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子球蛋白G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Creoside III  中文名：  分子式：C18H24O9  度：98.0%  兔子球蛋白Eelisa試劑盒   兔子球蛋白E試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子球蛋白E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子球蛋白E試劑盒、兔子球蛋白E elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Ethyl β-D-xylopyranoside  中文名：  分子式：C7H14O5  度：97.5%  兔子球蛋白Aelisa試劑盒   兔子球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子球蛋白A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子球蛋白A試劑盒、兔子球蛋白A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
人小細胞細胞現(xiàn)貨供應兔損傷分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羥甲基糠醛  分子式：C6H6O3  度：%

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。