使用方法：
收到細胞人永生化食管上皮細胞價格后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 人永生化食管上皮細胞價格
簡稱：NBK1

種屬：人

來源：食管上皮；男性

培養基：1640

狀態：貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE01525

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Fexofenadine   中文名：鹽酸非索非那定  分子式：C32H40ClNO4    高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Fenticonazole nitrate  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S    高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T

Fenofibric acid  中文名：非諾貝特酸  分子式：C17H15ClO4    病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

Fenbendazole  中文名：芬苯達唑  分子式：C15H13N3O2S    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒   48T
豬C反應蛋白elisa試劑盒   豬C反應蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   豬C反應蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬C反應蛋白試劑盒、豬C反應蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Silodosin  中文名：西洛多辛  分子式：C25H32F3N3O4 

豬C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  tert-Butyl rosuvastatin  中文名：  分子式：C26H36FN3O6S  度：98.0%

豬C反應蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sorafenib tosylate  475207-59-1  中文名：索拉非尼  分子式：C28H24ClF3N4O6S  度：98.0%  關鍵詞： 

豬B細胞瘤因子2elisa試劑盒   豬B細胞瘤因子2試劑盒   規格型號：96T/48T   豬B細胞瘤因子2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬B細胞瘤因子2試劑盒、豬B細胞瘤因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Teriflunomide  163451-81-8  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2  度：98.0%  關鍵詞： 

豬B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  tert-Butyl rosuvastatin  中文名：  分子式：C26H36FN3O6S
N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine  中文名：  分子式：C10H11N3  度：98.0%  兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O  度：98.0%  兔子視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Sulfaquinoxaline  中文名：磺胺喹噁啉  分子式：C14H12N4O2S  度：98.0%  兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Metamizole   中文名：安乃近  分子式：C13H16N3NaO4S  度：98.0%  兔子視黃醇結合蛋白4elisa試劑盒   兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒、兔子視黃醇結合蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Valsartan  中文名：纈沙坦  分子式：C24H29N5O3  度：99.0%  兔子透明質酸elisa試劑盒   兔子透明質酸試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子透明質酸試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子透明質酸試劑盒、兔子透明質酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
人永生化食管上皮細胞價格兔氧化抗體(OLAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7  度：98.0%

兔氧化抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3 

兔氧化   英文名稱：   Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein   規格：   48T/96T   英文縮寫：   oxLDL  Pemetrexed  137281-23-3  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C20H21N5O6 

兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔血小板衍化生長因子(rabbit PDGF)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  5-Fluorouracil  中文名：  分子式：C4H3FN2O2  度：98.0%

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。