使用方法：
收到細胞人直腸腺癌細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 人直腸腺癌細胞直銷
簡稱：SW1463

種屬：人

來源：直腸腺癌；女性

培養(yǎng)基：L15

狀態(tài)：貼壁

產品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0817

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Ketoprofen  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3    豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ketoconazole  中文名：酮康唑  分子式：C26H28Cl2N4O4    豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Jacaranone  中文名：  分子式：C9H10O4    豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ivermectin B1a  中文名：依維菌素  分子式：C48H74O14    豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Ivabradine   中文名：鹽酸伊伐布雷定  分子式：C27H37ClN2O5    豬肝細胞生長因子elisa試劑盒   豬肝細胞生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬肝細胞生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬肝細胞生長因子試劑盒、豬肝細胞生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
豬病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T  Shiraiachrome A  124709-39-3  中文名：  分子式：C30H26O10  度：%  關鍵詞：  抗生成; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫

豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Taxilluside A  中文名：  分子式：C18H24O10  度：97.5%

豬腸三葉因子elisa試劑盒   豬腸三葉因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬腸三葉因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬腸三葉因子試劑盒、豬腸三葉因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Tazobactam acid  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S  度：98.0%

豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Tebipenem pivoxil  中文名：泰比培南酯  分子式：C22H31N3O6S2  度：98.0%

豬腸三葉因子(ITF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sunitinib malate  341031-54-7  中文名：蘋果酸舒尼替尼  分子式：C26H33FN4O7  度：98.0%  關鍵詞：
p-Nitrohydrocinnamic acid  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  兔組織金屬蛋白酶抑制因子1   英文名稱：   Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TIMP-1

Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate  中文名：  分子式：C8H12O3  度：98.0%  兔合酶   英文名稱：   Rabbit Total Niic Oxide Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   T-NOS

Mecobalamin  中文名：甲鈷胺  分子式：C63H91CoN13O14P  度：98.0%  γ干擾素   英文名稱：   Rabbit γ Ierferon   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IFN-γ

Terbinafine   中文名：鹽酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN  度：98.0%  兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Domperidone  中文名：多潘立酮  分子式：C22H24ClN5O2  度：98.0%  兔子組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人直腸腺癌細胞直銷兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Chloroguanine riboside  中文名：6-氯鳥嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4  度：95.0%

兔子白介素3(IL-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名：6-芐氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O  度：98.0%   

兔子白介素2elisa試劑盒   兔子白介素2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子白介素2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子白介素2試劑盒、兔子白介素2elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  中文名：  分子式：C5H9N3O  度：98.0%

兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           6-Chloroguanine riboside  中文名：6-氯鳥嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4 

兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Benzyloxyindole  15903-94-3  中文名：6-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO  度：98.0%  關鍵詞：

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。