公司產品僅用于科研
中文名稱： 袋鼠腎細胞現貨供應
簡稱：PtK1(NBL-3)

種屬：長鼻袋鼠

來源：

培養基：

狀態：

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE0038
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞袋鼠腎細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
Methylprednisolone acetate  53-36-1  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠雙鏈DNA   英文名稱：   Double sand DNA   規格：   48T/96T   英文縮寫：   dsDNA

Methylprednisolone  83-43-2  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠多巴胺   英文名稱：   Dopamine   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Dopamine

Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6  度：%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠D乳酸   英文名稱：   Mouse D Lactic Acid   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DLA

Methyl levulinate  624-45-3  中文名：  分子式：  度：%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：98.0%  關鍵詞：  莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠凝血酶受體elisa試劑盒   小鼠凝血酶受體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠凝血酶受體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠凝血酶受體試劑盒、小鼠凝血酶受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Fosaprepitant dimeglumine  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P  度：98.0%

小鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Fudosteine  13189-98-5  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠凝血酶受體()ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Formestane  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3  度：98.0%

小鼠凝血酶敏感蛋白-1   英文名稱：   thrombospondin 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TSP-1  Folic acid  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6  度：98.0%

小鼠凝血酶抗凝血酶復合物elisa試劑盒   小鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒、小鼠凝血酶抗凝血酶復合物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Fosaprepitant dimeglumine  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P
Prasugrel  150322-43-3  中文名：普拉格雷  分子式：C20H20FNO3S    豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

Fexofenadine   153439-40-8  中文名：鹽酸非索非那定  分子式：C32H40ClNO4    Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人抗原(PHC)ELISA試劑盒

Adefovir  106941-25-7  中文名：阿德福韋  分子式：C8H12N5O4P    rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名：  分子式：C6H13NO    CLIAKitforATG(Humanai-thymocyteglobulin)ELISAKit人抗胸腺細胞球蛋白規格：48T/96T

Cyproheptadine   969-33-5  中文名：鹽酸賽庚啶  分子式：C21H22ClN    線粒體復合物I蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
袋鼠腎細胞現貨供應Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  鱸魚皮質醇   英文名稱：   Coisol   規格：   48T/96T   英文縮寫：   CO

Olopatadine   中文名：鹽酸奧洛他定  分子式：C21H24ClNO3  度：98.0%  鱸魚溶菌酶/胞壁質酶   英文名稱：   Lysozyme /Muramidase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Lysozyme

Tenofovir  中文名：泰諾福韋  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Naftopidil di  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3  度：98.0%  細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒   48T

Zileuton  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  偽毒(PRV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。