公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 狗腎惡性癥細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：DH82

種屬：狗

來(lái)源：腎；Golden Retrieve

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0072
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞狗腎惡性癥細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Myricadenin A  1612239-23-2  中文名：  分子式：C39H40O17  度：97.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Mumeose K  2132384-01-9  中文名：  分子式：C25H32O15  度：93.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Monobenzone  103-16-2  中文名：莫諾苯宗  分子式：C13H12O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞凋亡因子 (mouse Fas)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

Momor-cerebroside I  606125-07-9  中文名：  分子式：C48H93NO10  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠細(xì)胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

m-Nitrohydrocinnamic acid  1664-57-9  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    mouse Flt3 Ligand   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Furosemide  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S 

小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒、小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ganciclovir  82410-32-0  中文名：更昔洛韋  分子式：C9H13N5O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Furosemide  54-31-9  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S  度：98.0%   

小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Fumaric acid  中文名：  分子式：C4H4O4  度：%

小鼠凝血因子XIII B   英文名稱：   Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   F13B  Nandrolone laurate  26490-31-3  中文名：月桂酸諾龍  分子式：C30H48O3
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid  317374-08-6  中文名：  分子式：C16H15NO3    CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格：48T/96T

7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  160129-45-3  中文名：  分子式：C10H10ClNO    細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板50個(gè)

Nicorandil  65141-46-0  中文名：尼可地爾  分子式：C8H9N3O4    RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Dronedarone   141625-93-6  中文名：鹽酸決奈達(dá)隆  分子式：C31H45ClN2O5S    豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ，英文名： IL10 ELISA Kit

Bisoprolol fumarate  104344-23-2  中文名：富馬酸比索洛爾  分子式：C22H35NO8    Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
狗腎惡性癥細(xì)胞直銷α-Spinasterol  481-18-5  中文名：α-菠甾醇  分子式：C29H48O  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名：α-硫辛酸  分子式：C8H14O2S2  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠抗核抗體(mouse ANA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

α-Lapachone  4707-33-9  中文名：  分子式：C15H14O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠緊張素II(mouse ANG II)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

α-D-Glucose  492-62-6  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脂肪酸合成酶   英文名稱：   Mouse Fatty Acid Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FAS

    中文名：佐匹克隆  分子式：C17H17ClN6O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠促卵泡生成激素   英文名稱：   Mouse Follicle Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。