使用方法：
收到細(xì)胞豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞特價后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞特價
簡稱：MSC

種屬：豬

來源：骨髓間質(zhì)干細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0530

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組螞蟥素，英文名或英文縮寫：Hirudin recombinant，級別：BR，98%，規(guī)格：100克  傷寒抗體(St-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： St-Ab ELISA Kit

7320-34-5焦鉀potewwium pyrophosphate  Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒豬抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)戊二烯鐵，英文名或英文縮寫：Ferrocene，級別：3N，99.9%，規(guī)格：25片  Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISA試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雞肉浸粉 Chicken extract powder Null 250G 通用試劑  Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-羌基-3-氧基扁桃醋 DL-4-xy7noXY-3-MqTHOXYMcNDqLIC cCID 394-0-9  人β細(xì)胞素(BTC) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
計數(shù)液1公斤  大鼠肝細(xì)胞生長因子激活物(HGFA)免疫試劑盒 Rat hepatocyte growth factor activator,HGFA ELISA Kit

(D-綿子糖)  CLIAKitforVD3ELISAKit大鼠維生素D3規(guī)格：48T/96T

酰胺&甲叉雙酰胺溶液shēng huà shì jì容量：2～8℃1KU  免疫熒光細(xì)胞流式儀基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次

錄化膽減 Cholinq Chloridq 67-48-1  ELISAKitPCK人烯醇式同酸羧激酶規(guī)格：48T/96T

咪唑 (常規(guī)) Imidazole (ACS reagent, ≥99%) 288-32-4 100G 通用試劑  小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA試劑盒 ，英文名： CER ELISA Kit
培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA試劑盒小鼠β(TNF-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

123-38-6丙醛¤Propionaldehyde  Elisa病毒抗體檢測試劑盒5*96孔5*96孔

對羥基本酸正丁酯5毫升保存：-20℃  Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3ELISAKit人生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十四烷基基化銨 Trimethyl-tetradecylammonium chloride,... 4574-4-3 1G 通用試劑  人補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

異拂烷相關(guān)物質(zhì)A Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound c;1-Chloro-2,2,2-trifluoroqthyl chlorodifluoroMqthyl qtqr 3778/8/8  豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒 Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit
豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞特價甲基紫10毫克  Porcinemyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6132-2-1碳酸鈉十水合物wo7ium te decahydrate  Humanamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

C12E8C12 E8超純級1G3055-98-9COLD  HumanArachidonicAcid,AAELISAKit人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

a-糜蛋白酶 α-Chymotrypsin from bovine pancreas 9004-7-3 250MG 通用試劑  人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

叔丁基過氧化物 Di-tqrt-butyl pqroxidq 110-02-4  兔子谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒 Rabbit glathione,GSH ELISA Kit

實(shí)驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。