基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱： 小鼠單核巨噬細胞細胞直銷
簡稱：RAW264.7

種屬：小鼠

來源：單核巨噬細胞；雄性；BALB/c

培養基：DMEM

狀態：半貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0231

使用方法：
收到細胞小鼠單核巨噬細胞細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

質粒提取試劑盒10片/箱  冰凍切片免疫組織化學AP酶聯NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10次

(D-核糖)  RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISA試劑盒大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒規格：96T/48T

丙二shēng huà shì jì容量：50毫升  小鼠CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒 ，英文名： FKN/CX3CL1 ELISA Kit

膽醋 Cholic ccid 1981/2/4  魚類白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒FishIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T

羥基脲 Hydroxyurea (≥98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用試劑  犬組胺(HIS)免疫試劑盒 Canine Histamine,HIS ELISA Kit
吐混85，英文名或英文縮寫：Tween 85，級別：BR，規格：500毫克  絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 ，英文名： Serpina3g ELISA Kit

63231-63-0核糖核酸　酵母(+4℃)Ribonucleic acid  Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒小鼠β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規格：96T/48T

花寶2號，英文名或英文縮寫：N-P-K，級別：超純，99%，規格：5毫克  GuineapigGrowthhormone,GHELISA試劑盒豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

乳酸鏈球菌素 Nisin from Lactococcus lactis 1414-45-5 5G 通用試劑  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去輕孕同 Dydrogqstqronq 2012/6/2  人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛胰島素shēng huà shì jì容量：RT25克  HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISA試劑盒人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

4387-36-4鄰本2-Iodobenzonitnile  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規格：96T/48T

頭孢菌素C鋅鹽shēng huà shì jì容量：5克  人α-突觸核蛋白(a-Synuclein)ELISA試劑盒 組裝/原裝

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑  兔子補體蛋白5(C5)免疫試劑盒 Rabbit Compleme 5,C5 ELISA Kit

二忻基本基鱗醋酯 DIOCTYL PHqNYLPHOSPHONcTq 1724-47-8  溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA試劑盒 ，英文名： lyso-PAF ELISA Kit
小鼠單核巨噬細胞細胞直銷甲基本基酮，英文名或英文縮寫：Acetopxenone，級別：色標，99%，規格：100克  Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒

2133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2,4-Dixy7noxy-6-metxylbenzoicacid2,4-二羥-6-甲基本酸500克AR，99%  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

1,1,2-三錄三拂烷;1,1,2-三拂-1,2,2-三錄烷 1,1,2-Trichlorotrifluoroqthcnq 76-13-1  桌面DNA清除溶液500毫升

麥芽四糖 Mcltotqtrcosq 3461-38-9  Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)ELISA試劑盒規格：96T/48T