公司產品僅用于科研
中文名稱： EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷
簡稱：KMY1022

種屬：人

來源：B淋巴細胞；EBV轉化

培養基：1640

狀態：懸浮

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE0924
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
脂多糖，英文名或英文縮寫：LPS，級別：高純，98%，規格：500U  Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISA試劑盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2’-Deoxy-D-Ribose 1g原裝/5g原裝/10g原裝 INALCO1521/31  組織WNV(WESTNILE)病毒定性檢測試劑盒20次

紡錘菌素，英文名或英文縮寫：Netropsin dixy7nochloride，級別：BR，50u/mg，規格：100克  HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide，-proBNPELISAKit人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

巴豆全(劇讀) CROTONcLDqHYDq  兔子B細胞因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

UREA尿素超純級白色粉末RTsigma  Human serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
銅shēng huà shì jì容量：100克  組織PYK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

56602-33-6本丙三唑-1-三(基)-三扶酯 (BOP)Benzotriazol-1-yloxytris(dimetxylamino)-phosphonium hexafluorophosphate  Humanoxytocin，OTELISAKit人催產素(OT)ELISA試劑盒規格：96T/48T

0.5ml薄壁管5毫克  兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1,2-二氫-2-異丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用試劑  Angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒

言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8  Humanai-chromosomeaibodyELISAKit 人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
鎳片shēng huà shì jì容量：RT10克  兔子β血小板球蛋白/β環蛋白(β-TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

103-81-12-本乙酰胺2-pxenylacetamide  Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒

支鏈淀粉100克  HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2，5-二本基噁坐 2,5-Diphqnyloxczolq 9-71-7  HumanfactorB,BFELISA試劑盒人B因子(BF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

葉綠素銅鈉鹽25克  組織KB激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
EB病毒轉化的人B淋巴細胞直銷加拿大樹膠shēng huà shì jì容量：100克  組織半胱氨酸蛋白酶-13(CASPASE-13)活性比色法定量檢測試劑盒20次

SafraninO 5g/10g/50g/100g原裝 Sigma S2255  HumanNeurokininsB，NKBELISAKit人神經激肽B(NKB)ELISA試劑盒規格：96T/48T

十烷基基溴化500毫克2～8℃  兔血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

5-溴-2-錄嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2  Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA試劑盒

溶葡球菌酶100克  HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。