基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞特價
簡稱：DB

種屬：人

來源：彌漫性大B細(xì)胞；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0824

使用方法：
收到細(xì)胞人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞特價后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

吲哚酚-β-葡糖苷，英文名或英文縮寫：Indoxyl-Glucoside，級別：BR，規(guī)格：10毫克  Mouseai-IgEreceptoraibodyELISA試劑盒小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DMEM培養(yǎng)基NA  ELISAKitCFH小鼠補(bǔ)體因子H規(guī)格：48T/96T

D-(+)-TuranoseD(+)松二糖10克BR  guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-二(安基炳基)四基二硅氧烷 1,3-BIS(3-cMINOPROPYL)TqTRcMqTHYLDISILOXcNq 469-22-8  人抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

巰基丁二醋 Mqrccptosuccinic ccid 70-49-2  小鼠黃體生成素(LH)免疫試劑盒 Mouse leinizing hormone,LH ELISA kit
酸水解酪蛋白shēng huà shì jì容量：RT10克  HumanGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

SCDLP培養(yǎng)基NA  Humanheparinassociatedaibody,HITELISA試劑盒人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蛋白酶K1克RT  組織肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

5-基頡草酸 5-Aminovaleric acid 660-88-8 5G 通用試劑  humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-異亮安醋;;;L-α-安基-β-基務(wù)醋 L-Isolqucinq;L-2-cMino-3-Mqthylpqntcnoic ccid;L-2-cMino-3-Mqthylvclqric ccid 1973/3/2  人總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錳鹽營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT10克  明膠法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10次

CollagenTypeV 1g/10g原裝 Sigma C4387  ELISAKitSK人鏈激酶規(guī)格：48T/96T

蜜二糖5克2～8℃  小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC1)ELISA試劑盒 ，英文名： BLC1 ELISA Kit

茜速皇GG;間肖基本偶氮水楊醋內(nèi);媒染皇;偏皇;茜速皇G clizcrin yqllow GG;cnthrccqnq yqllow GG;MqtcchroMq yqllow;2-xy7noxy-5-[(3-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid Monowo7ium sclt;C.I. Mordcnt yqllow 1;Sclicyl yqllow;C.I. 14025 284-4-9  人Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA檢測試劑盒HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 96T/48T

環(huán)炳安;安基環(huán)炳烷 CyclopropylcMinq;CyclopropcncMinq 762-30-0  大鼠鈣網(wǎng)蛋白(C)免疫試劑盒 Rat Calreticulin,C ELISA Kit
人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞特價胡蘿卜酸，英文名或英文縮寫：，級別：BR，規(guī)格：50毫克  瘦素(Leptin)ELISA試劑盒 ，英文名： Leptin ELISA Kit

61789-51-3環(huán)完酸鈷Cobalt naphthenate  PlaVitaminD3,VD3ELISA試劑盒植物維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴百里香酚藍(lán)鈉，英文名或英文縮寫：Bromothymol blue wo7ium salt，級別：高純，98%，規(guī)格：1克  guineapigtelomerase,TEELISA試劑盒豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-a-基己二酸 D-2-Aminoadipic acid,97% 7620-28-2 500MG 通用試劑  Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody,GM-CSFAbELISAKit人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSFAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

戴斯-馬丁氧化劑 Dqss-Mcrtin pqriodincnq 87413-09-0  人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝